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食管癌是全世界最致命的恶性肿瘤之一,在过去几十年中,食管癌的发病率急剧增加。尽管食管癌患者的治疗方案和治疗手段在不断进步,但现阶段食管癌的5年生存率和5年食管切除术后生存率的结果仍然不理想。在现阶段的治疗过程中,食管癌通常在其晚期被诊断出来,主要原因是缺乏早期临床症状,为了改善手术后患者的预后,这些患者通常接受新辅助同步放化疗（CCRT）治疗,以减小肿瘤大小。然而,对于对CCRT反应不佳的患者,CCRT可能会增加毒性水平并可能导致手术延迟,从而进一步推高了食管癌的死亡率。食管鳞状细胞癌（ESCC）作为食管癌在中国的高发疾病亚型,是食管癌死亡的主要原因,发病率超过125/100,000/年。中国的庞大人口和高发病率导致中国拥有地球上所有ESCC病例的一半左右。这些地区同时也是贲门腺癌的高发地区;在某些地区,这两种癌症占死亡人数的25%。MicroRNAs（miRNAs）是一类小型非编码RNA,它们可以负调控蛋白质编码和基因转录,并且与几乎所有已知的生理和病理过程相关,尤其是癌症。miRNA可以影响癌症发病机制,作为癌基因或肿瘤抑制因子发挥关键作用。miRNA在食管癌的发展和转移过程中发挥了重要的作用,因此在检测中,他们常被用于检查食管癌的发生。在食管癌中,miRNA失调在癌症预后和患者对辅助治疗的反应中起着至关重要的作用。本文就miRNAs的致癌、抑癌、耐药相关作用及其在食管癌发病机制和治疗中的作用进行了相关研究。现阶段的研究中,miR-375在多种癌症中显著下调,并通过靶向AEG-1、YAP1、IGF1R和PDK1等几种重要癌基因来抑制癌症发生。miR-375在癌症中的改变是由多种机制引起的,包括转录因子的失调、异常的启动子甲基化等。组织或循环中miR-375的表达降低可能表明肿瘤的存在以及许多恶性肿瘤的不良预后。此外,miR-375在体外和体内能够抑制肿瘤细胞生长,miR-375代表了开发靶向治疗的方向。在这里,我们提出了新的科学假设,细胞间传递的miR-375在ESCC的进展和转移中发挥了至关重要的作用。围绕这一科学假设,我们在后期的实验中得出了以下3点结论。1.miR-375通过抑制癌细胞的增殖活性和迁移能力减少了 ESCC肿瘤的增长。用miR-375类似物处理ESCC细胞后,我们对ESCC细胞进行EdU染色、Transwell测定、肿瘤球形成测定和流式细胞术发现miR-375对ESCC细胞生物学功能有明显的抑制作用。ESCC细胞增殖、侵袭、迁移和肿瘤球形成均受到了抑制。同时我们还发现ESCC细胞发生了细胞凋亡。此外,我们通过采用RT-qPCR和蛋白质印迹分析也发现凋亡相关基因（如Bcl-2、Bcl-xl和Bax）发生了上调,而干性相关基因（如CD133、Nanog和OCT-4）则下调。这一结果表明miR-375抑制ESCC细胞的增殖、侵袭、迁移和干性,同时刺激ESCC细胞凋亡。2.miR-375通过影响ENAH基因的表达影响ESCC的发生通过使用 starBase、TargetScan、DIANA 和 mirDIP 数据库对 miR-375 的下游靶基因预测,我们发现了 821、301、1251和645个miR-375的候选调控基因。此外,通过对GEO数据库中的GSE29001和GSE20347数据集的微阵列分析,我们筛选了 843和432个miR-375调控的差异表达基因。我们发现ENAH是唯一的相交基因。同时ENAH在ESCC组织中的表达高于相邻正常组织中的表达。进一步研究发现,ENAH表达下降,ESCC细胞的增殖活力、侵袭和迁移能力及肿瘤球形成能力均下降,细胞凋亡升高,而ENAH表达增加,ESCC细胞的增殖活力、侵袭和迁移能力及肿瘤球形成能力均增加,细胞凋亡下降;同时ENAH的表达则减弱了 miR-375对ESCC细胞增殖、侵袭、迁移和肿瘤球形成的抑制作用。综上所述,miR-375下调ENAH以抑制ESCC细胞增殖,在血管、迁移、干性和体外促进细胞凋亡。3.miR-375是通过人脐带间充质干细胞（hUCMSC）来源外泌体调控ESCC的发展通过投射电镜（TEM）,我们证实了 hUCMSCs中分离的外泌体具有相似形态的圆形或椭圆形膜囊泡（直径40-150nm）。同时,通过RT-qPCR确定miR-375在纯化的hUCMSCs-exo中高表达。将hUCMSCs-exo与ESCC细胞共培养。ESCC细胞能够摄取hUCMSCs-exo利用外泌体中的miR-375。使用miR-375抑制剂与hUCMSCs-exo处理的ESCC细胞共培养发现hUCMSCs-exo减弱了 ESCC细胞的增殖、迁移、侵袭和肿瘤球形成,同时增强了 ESCC细胞的凋亡。综上所述,本研究旨在探讨人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）来源的miR-375外泌体在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的作用机制。通过检测miR-375及其靶向激活同源物（ENAH）在食管鳞癌组织和细胞中的表达,检测其表达改变对食管鳞癌增殖、侵袭、迁移和肿瘤形成的影响。分离转染hUCMSCs来源的外泌体（hUCMSCs-exo）,并与ESCC细胞共培养,观察hUCMSCs外泌体介导的miR-375对ESCC发育的影响。最后,我们研究了 miR-375在体内对肿瘤生长的影响。hUCMSCs-exo可以通过miR-375抑制ENAH的表达,进而抑制ESCC的发生和发展。