为研究山羊乳腺上皮细胞（GMEC）增殖和分化特性及为生产转基因动物创造条件,需要建立适合GMEC体外增殖的培养体系。用无菌手术法从健康的泌乳期西农萨能奶山羊取得乳腺组织进行体外条件下的培养。基础培养液为D-MEM/F-12,　含10%胎牛血清,　添加EGF　（0.01mg/L　）、氢化可的松（1mg/L　）、孕酮（1　mg/L　）、胰岛素-转铁蛋白-硒钠（5mg/L）、青霉素（0.　05g/L　）　及链霉素（0.　05　g/L）。从细胞形态、细胞群体倍增时间、细胞生长曲线等方面考察了不同生长因子对GMEC的促生长作用。通过有效的细胞培养方法获得山羊乳腺上皮细胞系,系统观察了乳腺上皮细胞的长出、贴壁、聚集、迁移、分裂、分化、调亡等一系列形态变化。其结果如下:　1.　用组织块培养法可获得良好的山羊乳腺细胞原代培养物;培养的山羊乳腺成纤维细胞比上皮细胞对胰蛋白酶更敏感,据此可在传代过程中将二者分离纯化,获得纯细胞系;混合培养物先用0.25%胰蛋白酶在37℃消化5⁷min 所收集的细胞主要为成纤维细胞;再加0.15%胰蛋白酶-0.02%EDTA 消化液在37℃继续消化5⁶min 所回收的细胞绝大多数为上皮细胞,经过2³ 代,即可得到纯化的乳腺上皮细胞系。　2.　　以RPMI1640 为基础培养液,山羊乳腺上皮细胞在含血清、双抗的同时,添加氢化考的松、Insulin、IGF-1、E2、EGF 及ITS 的不同组合,以细胞生长群体倍增值为参考标准,评估不同组合的生物活性因子对山羊乳腺上皮细胞生长的影响。结果表明:培养液中添加氢化考的松、IGF-1、EGF 及ITS 对细胞生长有较明显的促进作用,其倍增时间是34h。　3.细胞生长曲线表明,传代培养的乳腺上皮细胞在接种后有2d 的滞留期,之后为对数生长期,持续4d 左右,第7d 进入平台期。　4.GMEC 的适宜冻存液为DMEM/F₁₂,添加30%FCS 和10%的二甲基亚砜（DMSO）,适宜的冷冻降温方法是以-1℃/min 的速度从4℃降至-25℃,30min 后投入液氮进行低温保存。　5.GMEC和成纤维细胞混生时分区生长,界限明显。传代的乳腺上皮细胞呈岛屿状聚集生长。可以形成网状结构,圆顶形结构。细胞核呈圆形或椭圆形,核仁2-4枚