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金黄色葡萄球菌和链球菌是奶牛乳腺炎的重要致病菌,抗生素已经无法有效的防治金黄色葡萄球菌和链球菌感染。疫苗免疫接种已经成为防治金黄色葡萄球菌和链球菌感染的有效措施。研究表明,在金黄色葡萄球菌和链球菌感染过程中,细胞免疫应答和体液免疫应答均发挥重要作用。因此,有必要研究能够同时预防金黄色葡萄球菌和链球菌感染,且诱导细胞和体液免疫应答的多表位疫苗。金黄色葡萄球菌FnBPA和链球菌GapC高度保守,具有良好的免疫原性,本实验构建包含FnBPA和GapC1-150的CD4+T细胞表位和B细胞表位的多表位疫苗,并对其免疫原性进行了研究。用FnBPA CD4+T细胞表位FT(FnBPA488-505)和B细胞表位FB1(FnBPA352-364)、FB2(FnBPA763-772)构建表位疫苗FTB2、FB1B2和FTB1B2。免疫接种BALB/c小鼠,评价其免疫效力。结果,FTB1B2诱导的细胞因子水平显著高于其他表位疫苗,但低于FnBPA;诱导的IgG水平除低于FB1B2和FnBPA外、显著高于其他表位疫苗。FTB1B2免疫小鼠器官中的细菌定殖数显著低于其他表位疫苗、但高于FnBPA免疫小鼠。表明,多表位疫苗FTB1B2可以诱导较强的细胞和体液免疫应答,并有效地抑制金黄色葡萄球菌的定殖。用GapC1-150的CD4+T细胞表位GT(GapC63-77)和B细胞表位GB1(GapC30-36)、GB2(GapC97-103),构建表位疫苗GTB1、GB1B2和GTB1B2。免疫接种BALB/c小鼠后分析其免疫原性。结果,GTB1B2诱导的细胞因子水平及IgG水平显著高于其他表位疫苗免疫组,但显著低于GapC1-150免疫组。GTB1B2免疫组小鼠脏器中的停乳链球菌定殖数显著低于其他免疫组,但显著高于GapC1-150免疫组。表明,多表位疫苗GTB1B2可以诱导强烈的细胞和体液免疫应答及良好的抗停乳链球菌感染的免疫保护作用。串联FTB1B2与GTB1B2、FT与GT,构建表位疫苗FG和FGT,免疫BALB/c小鼠,评价其免疫效果。结果,FGT仅能诱导细胞免疫应答,免疫小鼠不能显著抑制金黄色葡萄球菌和停乳链球菌在器官中定殖;FG诱导的细胞因子水平及IgG水平虽然显著高于其他免疫组,但显著低于FTB1B2和GTB1B2;其免疫小鼠各器官细菌定殖数显著低于其他免疫组,显著高于FTB1B2和GTB1B2,但能够同时抑制金黄色葡萄球菌和停乳链球菌在各器官的定殖。上述结果表明,表位疫苗中的T细胞表位和B细胞表位共同抵御金黄色葡萄球菌和链球菌感染,本实验构建的FG表位疫苗能够诱导良好的免疫应答,并能同时抑制攻毒小鼠器官中金黄色葡萄球菌和停乳链球菌的定殖。