早胚发育促进因子-1作用靶分子的筛选大鼠卵母细胞能在联合培养系统中成批成熟

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lqwhappy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
输卵管蛋白(Oviduct-specificglycoprotein,Oviductin)是哺乳动物输卵管粘膜上皮细胞特异性表达分泌的高糖基化蛋白质,普遍存在于各种哺乳动物的输卵管分泌物中,为配子的成熟、转运、受精和早胚的发育营造了一种适宜的微环境,但具体的作用机制尚不清楚。本实验室从兔输卵管粘膜上皮细胞的cNDA文库中筛选出兔的全长OviductincDNA(1.9kb),其演绎分子量为64kDa,命名为早胚发育促进因子-1(DevelopmentPromotingFactor-1,DPF-1)。DPF-1与其它物种的输卵管糖蛋白具高度同源性。为了研究其在早胚发育过程中潜在的生物学功能,进行了下列实验: 建立了离体未完全分化颗粒细胞、动情前期垂体前叶和△-4雄烯二酮组成的“联合培养系统”。该联合培养系统可模拟正常生理状态下卵泡中各相关细胞间的协同作用,更有效地诱导经己烯雌酚刺激后大量源自大鼠早期三级卵泡中卵母细胞同步成熟,并能正常受精和发育。经DES刺激,每侧幼龄大鼠卵巢中平均可取得189枚同步发育的卵母细胞,经在联合培养系统中培养,77.6%的卵母细胞排出第一极体达到成熟。这些成熟的卵母细胞中87.8%可正常受精,93%卵裂;经体外培养96h,有59%的受精卵可发育到桑椹或囊胚。2-细胞期胚胎移植后可发育成为健康个体。为研究大鼠卵成熟、受精和早胚发育的分子机制所需的大量实验模型提供了物质基础。 为了从分子水平研究DPF-1在早期胚胎发育中的作用机制,建立了大鼠成熟卵母细胞pMyrcDNA文库,文库容量为8x105pfu/ugcDNA。pSos/1.9kbDPF-1cDNA诱饵蛋白质粒对大鼠成熟卵母细胞pMyrcDNA文库进行了双杂交筛选,从大鼠成熟卵母细胞pMyrcDNA文库中初筛出132个阳性克隆,终筛出1个阳性克隆。经测序提示插入片段约为400bp核苷酸,核苷酸序列同源性分析比较,发现与activatingsignalcoihtegrator1complexsubunit2(ASC-1complexsubunitp100)蛋白核苷酸序列有93%一致性。p100蛋白在多种组织中表达,特别在卵巢组织和移植前胚胎中广泛表达,并与p50、p200和ASC-1共同组成了ASC-1复合体,来调节SRF(serumresponsefactor)、AP-1(activatingprotein1)和NF-B(nuclearfactorB)等转录因子的活性。对p100蛋白与DPF-1相互作用关系进行研究可望为进一步深入分析输卵管蛋白的作用机制提供线索。
其他文献
  本文在深入永定区所有乡镇及主要的机关、企业、街道的点、线、面的调查的基础上结合近五年统计数据,对作为张家界核心服务区永定区的生态经济现状和发展趋势进行了分析,得
“劳动”理念下特色综合实践活动课程项目的设计要从顶层符合劳动教育发展规律,可以以生产劳动(劳动实践体验)为主线,兼具家庭劳动、社会劳动(志愿服务、职业体验)、科技劳动
经临床研究发现,高功率的固定波长红光具有促进细胞代谢活动,改善肌肉萎缩,加快组织修复,并有一定的消炎和镇痛作用,开始广泛应用于临床。  STM32具有性价比高、外设丰富、集成
并联型工业机器人具有速度和加速度快、机械臂轻、性价比高等优点,与串联型工业机器人一起构成了工业机器人非常重要的两种机构类型。在电子元件、塑料橡胶、医药化工、食品制
本文通过对荣华二采区10
期刊
劳技课程基于“做中学”和“学中做”,具有很强的实践性,其基本技能与态度的习得是以学生的个体经验和亲身实践为基础.劳技课程应在现实生活中选择那些与科技发展趋势相关的
α晶状体型热休克蛋白(alpha-crystallin-type heat shock protein,α-HSP)是脊椎动物眼睛晶状体中的一个结构蛋白,但在脊椎动物除了眼睛之外的其他组织器官中也表达α-HSP,其他
Along with the rapid development of the modern industry and the information technology, electric powers users more and more pay attention to the requirements of the quality of electric power day by da
在综合实践活动中,如何因地制宜,依托本土资源地方特色,结合自己学校的特点和学生的需要,整合资源,开发具有特色的校本课程是一个热点问题.本文就自主开发的“花卉组合盆栽”
摘要:数学课堂教学是学生在校期间学习文化科学知识的主阵地,也是对学生进行思想品德教育的主渠道。课堂教学不但要加强双基而且要提高智力;不但要发展学生的智力,而且要发展学生的创造力;不但要让学生学会,而且要让学生会学,尽量在有限的时间里出色地完成教学任务。  关键词:课堂教学;教学目标;基础知识;基本技能;基本方法  中图分类号:G633.6 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2016)0