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禽网状内皮组织增殖病(Reticuloendotheliosis，RE)是由禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)引起的鸡、火鸡、鸭、鹌鹑、雉和鹅等以淋巴网状细胞增生为特征的肿瘤性疾病。尽管REV本身对禽的致死作用并不很明显，但由于REV能使法氏囊萎缩，其致病基因V-rel能引起B淋巴细胞转化为肿瘤细胞，侵损禽机体免疫系统，使机体抵抗力下降，从而导致其它疾病的并发感染，造成高淘汰率和高死亡率；血清学调查表明，我国鸡群感染REV的比率很高。建立REV的检测方法是当务之急。 研究一：通过制备纯化的REV和鸡抗REV的特异性血清，并在单抗11B118的基础上，初步建立了单抗捕捉的快速检测REV抗体的ELISA诊断方法，对影响ELISA的各项反应条件进行了优化。实验结果表明，美国Coning公司生产的酶标板的变异系数为2.9％；单抗的最适包被浓度为1∶1280；最适封闭液为1％的BSA，封闭条件为37℃1h；抗原的最佳稀释度为1∶320；血清的稀释度为1∶20；HRP-兔抗鸡IgG的工作浓度为1∶15000，待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1h；底物在室温显色时间为10min。根据已建立的ELISA反应条件，确定阴阳临界值为0.253。用本方法与IDEXX公司生产的ELISA试剂盒分别对200份血清进行了检测，两者的符合率为87％。所建立的方法与鸡新城疫、传染性支气管炎、马立克氏病的阳性血清无交叉反应。 研究二：用自行研制的ELISA试剂盒对15公司的43个养殖场约1674份血清进行了血清学检测，实验数据表明，养殖场的总阳性率为93.1％，同一养殖场阳性率也很高，从28％到100％。在进行血清学调查的同时，对某公司进行了深入调查，结果表明，禽网状内皮组织增殖病(RE)阳性检出率在85.71％～100％，其后代的阳性检出率在0％～44.83％。其中，部分鸡群出现了一种以腺胃、肝脏、肾脏、脾脏等器官组织肿瘤样变的传染病，经间接免疫荧光试验、IDEXX公司试剂盒和自行研制的试剂盒进行确诊，证明为禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)感染所致。 研究三：基于Light Cycler平台，利用SYBR GreenI染料能特异与双链DNA结