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目的:感音神经性耳聋在临床上很常见,原因主要在于耳蜗毛细胞在噪音、耳毒性药物、衰老等因素的诱导下,容易发生凋亡,而成年哺乳动物的毛细胞不能自发再生。带caspase凋亡募集域的凋亡抑制因子(Apoptosis repressor with caspase recruitment domain,ARC)是具有调节内、外源性凋亡通路的关键因子,然而目前还没有关于ARC与内耳毛细胞的相关报道。本研究利用耳蜗毛细胞样细胞,HEI-OC-1 细胞(House Ear Institute Organ of Corti l cell),来研究ARC在新霉素诱导的耳蜗毛细胞凋亡中的作用及机制。方法:实验采用PCR,Western blot,免疫荧光来检测ARC在耳蜗毛细胞和HEI-OC-1细胞内是否表达及新霉素作用后表达含量的变化。接着通过siRNA下调ARC表达,TUNEL染色及流式细胞仪检测Annexin V/PI,来观察ARC对新霉素诱导的HEI-OC-1细胞凋亡的调节作用。最后通过RT-qPCR、免疫荧光、流式细胞仪检测ARC表达下调后,HEI-OC-1细胞内活性氧、线粒体膜电位、凋亡因子变化,来研究ARC调节新霉素诱导的HEI-OC-1细胞凋亡的机制。结果:实验首先发现ARC在耳蜗毛细胞和HEI-OC-1细胞均有表达,但在耳蜗支持细胞没有表达。其次发现ARC在耳蜗毛细胞和HEI-OC-1细胞的表达量在新霉素作用后逐渐下降,并且当我们用siRNA下调ARC表达后,HEI-OC-1细胞对新霉素的敏感度增加,表明ARC参与调节新霉素诱导的HEI-OC-1细胞的凋亡。最后实验发现ARC表达下调将增加HEI-OC-1细胞内活性氧的含量,促使线粒体膜电位下降,增加促凋亡因子的表达,从而调节新霉素诱导的HEI-OC-1细胞凋亡。结论:本研究的成果表明ARC参与调节耳蜗毛细胞凋亡,可作为研究耳蜗毛细胞凋亡的基因靶点。