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目的研究MMP-10是否在结直肠癌、癌旁、正常组织中差异性表达。探讨MMP-10调控结直肠癌细胞的机制,可为发现阻断其进展的关键靶点。方法收集结直肠癌患者的正常、癌旁、癌组织大约40例,利用免疫组化技术和Western Blotting/qPCR技术定性定量的分析MMP-10及mRNA在结直肠癌组织、癌旁组织、正常组织中表达,用统计学分析其差异性。构建慢病毒载体,分别培养抑制表达、过表达和对照三种细胞系NCM460(正常细胞),SW480(原位癌细胞),SW620(转移后癌细胞),提取RNA和蛋白质,通过westblot、real-time PCR检测SiRNA抑制细胞系中MMP-10的表达情况,以及检测其抗凋亡能力,增殖迁移能力,以及EMT通路的关键因子。分别使用干扰后的SW620细胞系皮下注射成肿瘤,根据肿瘤的大小,转移情况。结果1.Western blot实验、IHC实验、qPCR检测检测结果均显示,在癌组织(图中用C表示)、癌旁组织(图中用P表示)中MMP-10蛋白表达水平均高于正常组织(图中用N表示)(P<0.05),并且癌旁组织中MMP-10蛋白表达水平均高于正常组织(P<0.05)。2.MMP-10在NCM460、SW480、SW620、HCT116、HT29细胞中随着细胞系的恶性程度的增加,MMP-10蛋白的表达逐渐增强,MMP-10在结肠癌淋巴结转移细胞中的表达(SW620)高于原位结肠癌细胞(SW480、HCT116、HT29)(P<0.05)和结直肠正常肠上皮细胞(NCM460)(P<0.05)。3.CCK-8实验对慢病毒转染后的NCM460、SW480、SW620细胞增殖进行检测,结果显示过表达MMP-10促进SW480、SW620的细胞增殖,当细胞生长到第36h时开始显示差异(P<0.05)。抑制MMP-10的表达后则对SW480、SW620细胞的生长抑制不明显(P<0.05)。4.在Transwell侵袭和迁移实验表明,相对于对照组,过表达MMP-10促进SW480、SW620细胞的侵袭和迁移作用(P<0.05),抑制MMP-10的表达则抑制SW480、SW620细胞的侵袭和迁移作用(P<0.05)。5.慢病毒转染后的SW480、SW620细胞Western-blot结果显示,与对照组相比,过表达MMP-10后SW480细胞间质细胞标志物N-钙粘素和波形蛋白表达量增加(P<0.05),上皮细胞标志物E-钙粘素表达量减少(P<0.05)。当抑制MMP-10后,上皮细胞标志物E-钙粘素表达增加(P<0.05),而间质细胞标志物N-钙粘素和波形蛋白表达均有所下降(P<0.05)。6.MMP-10促进结肠癌细胞SW620细胞系在动物体内肿瘤生长,动物皮下成瘤实验的结果显示,与对照组相比,过表达MMP-10的SW620细胞成瘤的瘤体直径较大(P<0.05),表明过表达MMP-10有助于促进肿瘤生长,而抑制MMP-10的表达体内成瘤的瘤体直径较小(P<0.05),表明抑制MMP-10后则抑制肿瘤生长。结论在癌旁组织、癌组织中MMP-10蛋白表达水平均高于正常组织。MMP-10在结肠癌淋巴结转移细胞中的表达(SW620)高于原位结肠癌细胞(SW480、HCT116、HT29)和结直肠正常肠上皮细胞(NCM460)。MMP-10通过调控EMT通路的关键因子促进结肠癌细胞SW480、SW620的增殖、侵袭、迁移,以达到对结直肠癌的调控。