拟南芥耐逆突变体筛选

来源 :山东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:p_y112233
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植物生存的环境是不断变化的,为了生长发育和繁殖产生后代,针对不同的环境因子会以不同的方式加以感受、识别,并作出相应的生理反应,最终适应环境。若环境变化太剧烈,超出了植物正常生长发育所能忍受的限度,就会对植物产生胁迫。植物逆境胁迫通常主要指非生物胁迫,包括高温、低温、氧化胁迫、干旱、高盐及低钾胁迫。土壤盐碱化是影响农作物生长和增产的最主要的环境因素,导致大量农作物减产,因此对植物耐盐机理的研究以及耐盐作物品种的培育是十分重要的。由于对植物耐盐性调控网络的了解还不很清楚,因此尚需进一步寻找植物基因组中与耐盐有关的基因,并研究这些基因的功能。  本研究从三种不同的T-DNA激活标签突变体库中筛选耐盐及盐敏感突变体,以期对植物耐盐机制的阐述提供理论基础。三种不同的激活标签突变体库分别为:普通的功能获得型激活标签突变体库,激活标签质粒载体为pSKI015,选择标记为除草剂抗性;β-雌二醇诱导的激活标签突变体库,激活标签质粒载体为pER16,其上有XVE表达系统,选择标记为卡那霉素抗性;功能获得型激活标签突变体库,激活标签质粒载体为pSKI074,选择标记为卡那霉素抗性。  对普通的功能获得型激活标签突变体库和β-雌二醇诱导的激活标签突变体库共5000个株系进行了耐高盐突变体的筛选,筛选盐浓度为200 mmol/L NaCl,筛选指标为在这种胁迫下野生型拟南芥幼苗根的生长受到明显抑制,恰好不发生弯曲,最终得到3株可以遗传到T2代的突变体,但是表型不能继续遗传给下一代。对功能获得型激活标签突变体库共1000个株系分别进行了耐低钾高盐与低钾低盐敏感突变体的筛选,低钾培养基中钾离子含量为40μmol/L,筛选盐浓度分别为150 mmol/L和50 mmol/L NaCl,筛选指标为:低钾培养基中150 mmol/L NaCl浓度是使野生型拟南芥幼苗不发生弯根的初始盐浓度;低钾培养基中50 mmol/L NaCl浓度是使野生型拟南芥幼苗弯根程度最大的盐浓度,没得到能够稳定遗传的低钾耐高盐与低钾低盐敏感突变体。尽管最终没能得到稳定遗传的突变体,可是本论文的工作却为进一步筛选其他突变体植株提供了重要参考。
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