细胞因子和造血干细胞移植在辐射损伤动物治疗中的应用研究

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目的:联合应用重组人白介素11(rhIL-11)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)治疗辐射引起的急性放射病动物模型,观察其疗效。应用转hOSM(人抑瘤M)基因细胞作为饲养层,观察其体外促进造血干/祖细胞(HSPC)增殖、抑制HSPC分化和维持HSPC归巢能力的作用。方法:(1)建立60Coγ射线急性放射病比格狗动物模型,在对症治疗的基础上,联合应用rhIL-11和rhG-CSF,观察动物的一般情况、外周血象、外周血有核细胞早期凋亡和坏死率、血浆中细胞因子浓度及组织病理学变化。(2)用分子生物学技术建立转hOSM基因细胞系,免疫磁珠法分离脐带血CD34+HSPC,以转基因细胞作为饲养层对其进行扩增,观察其抑制HSPC分化的作用;将扩增后的CD34+HSPC移植入急性放射病SCID小鼠体内,应用荧光显微镜和RT-PCR法检测移植效果。结果:(1)急性放射病比格狗经细胞因子治疗后,45天存活率升高,外周血象也明显改善;外周血有核细胞早期凋亡和坏死率明显降低;外周血血浆中IL-2和IFN-γ浓度在早期均升高,随后IL-2浓度迅速下降,IFN-γ浓度相对比较稳定;骨髓组织病理学结果显示造血明显恢复。(2) HSPC与饲养层细胞共培养7天后,CD34+HSPC比例仍维持在70%左右,绝对数量增加了9.4倍,其表面归巢相关分子CXCR4和CD54阳性率仍较高,植入SCID小鼠体内4周后,可成功归巢到小鼠骨髓,继续共培养,CD34+HSPC的绝对数量在培养14天时达最高值。结论:rhIL-11和rhG-CSF联合应用可促进急性放射病比格狗造血和免疫功能的改善和恢复,建立的转hOSM基因饲养层细胞可以有效地扩增HSPC,抑制其分化,并维持其较高的移植效率和造血活性。细胞因子联用和造血干细胞移植均是治疗辐射损伤的有效策略。
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