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杆菌肽是具有广谱抗菌效果的多肽类抗生素,主要生产菌株为地衣芽胞杆菌,其更为稳定的络合物杆菌肽锌被广泛的应用于动物饲料添加。然而杆菌肽大规模生产过程中造成强烈的异味污染严重影响工厂周边居民的身心健康。支链短链脂肪酸（BCCAs）被认为是引起异味的主要物质。本研究优化杆菌肽的发酵生产菌株Bacillus licheniformis DW2,以其为出发菌株构建低异味工程菌,降低其支链短链脂肪酸合成能力。本研究根据BCCAs合成的相关路径,以B.licheniformis DW2为出发菌株分别构建了缺失bkd操纵子转录调控因子（Bkd R）、亮氨酸脱氢酶（Bcd）、两种支链氨基转移酶（Ybg E、Ywa A）、二羟酸脱水酶（Ilv D）、α-酮酸脱氢酶复合体E1β亚基（Bkd AB）、磷酸丁酰辅酶A转移酶（Ptb）的工程菌DW2△bkd R、DW2△bcd、DW2△ybg E、DW2△ywa A、DW2△ilv D、DW2△bkd AB、DW2△ptb。通过气相色谱检测发酵终点时发酵液上清中的BCCAs,DW2、DW2△bkd R BCCAs浓度分别为3.25g/L、7.92 g/L,DW2△bkd R相对于DW2提高了143.7%,无降低异味效果;支链氨基转移酶缺失对支链短链脂肪酸合成无影响,无降低异味效果;DW2△bcd、DW2△ilv D、DW2△bkd AB、DW2△ptb BCCAs的浓度分别为1.67、2.82、1.47、2.13g/L,相对于DW2分别减少了48.6%、13.2%、54.5%、34.3%。Bcd、Bkd AB、Ptb的缺失使BCCAs浓度大幅降低,这些酶是参与BCCAs合成的关键酶。通过高效液相色谱检测这几种酶缺失的工程菌发酵终点时发酵上清中的杆菌肽的效价,DW2△bcd、DW2△bkd AB、DW2△ptb杆菌肽效价分别为595.5、372.8、631.9 U/m L,相对于DW2分别减少了18.1%、48.7%、13.1%。Bkd AB的缺失对杆菌肽合成能力影响较大,不适宜作为构建工程菌的靶酶。而Bcd、Ptb缺失菌单位菌体的杆菌肽效价甚至高于原始菌株,对杆菌肽合成的影响相对较小,DW2△bcd、DW2△ptb可作为低异味产杆菌肽工程菌。为了增强对胞内BCCAs合成前体支链酰基辅酶A和BCCAs自身的利用以减少胞外BCCAs的浓度,在菌体内增强支链脂肪酸（BCFAs）的合成。构建游离表达β-酮酰ACP合酶Fab HA、Fab HB的工程菌,通过气相色谱检测发酵终点时发酵液上清中的BCCAs,DW2/p HY-P43fab HA BCCAs的浓度3.30 g/L,与原始菌株DW2相比无较大差异;DW2/p HY-P43fab HB BCCAs的浓度为2.34 g/L,与原始菌株DW2相比减少了28%,效果良好。游离表达β-酮酰ACP合酶Fab HB的工程菌对杆菌肽生产中的异味降低效果明显,强化表达Fab HB有降低异味的潜能。