火龙果花的化学成分研究及黄酮、三萜和木脂素类化合物的质谱解释

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火龙果(Pitaya),又名青龙果、红龙果、仙蜜果,为仙人掌科量天尺属(Hylocereus Brittonet Rose)植物。火龙果原产中美洲的哥斯达黎加、墨西哥、古巴等地,亚洲地区主要分布在越南和中国的广西、广东、台湾、海南、福建等省。研究表明,该植物果实具有解重金属中毒功效;具有抗自由基、抗氧化、抗衰老的作用;能预防脑细胞变性,预防高血压,抑制痴呆症的发生;具有明目、保胃、润肺止咳、清热降火的功效;其对肿瘤生长、病毒及免疫反映抑止等症状表现出了积极作用。至今为止,国外已有学者对火龙果的化学成分和药理进行了研究,而国内学者对火龙果的化学成分研究较少。本课题组已经研究了火龙果花石油醚和正丁醇萃取物的化学成分,为了全面的了解火龙果的化学成分,本论文对火龙果花的氯仿和乙酸乙酯萃取物的化学成分进行了研究。本论文由三部分组成。第一部分介绍了火龙果的研究进展,主要包括国内外对该植物化学成分及药理作用的研究概况。第二部分是提取分离及结构鉴定,研究火龙果花氯仿和乙酸乙酯萃取物的化学成分。第三部分研究了7个黄酮、5个三萜和2个木脂素类化合物的电喷雾质谱裂解规律。本论文利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶LH-20柱层析、反相C-18柱层析、重结晶、制备型薄层层析等方法对火龙果花氯仿和乙酸乙酯萃取物的化学成分进行分离和纯化;利用熔点、正相和反相薄层层析法等方法来检测分离得到的化合物的纯度。火龙果花氯仿和乙酸乙酯萃取物主要的分离、纯化过程如下:火龙果花经粉碎,用75%乙醇提取,得到的浸膏分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取。取氯仿萃取物,经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚(0:100→100:0)依次洗脱)分离,得到六个组份c-Fr.Ⅰ、c-Fr.Ⅱ、c-Fr.Ⅲ、c-Fr.Ⅳ、c-Fr.Ⅴ和c-Fr.Ⅵ。利用硅胶柱层析,从组份c-Fr.Ⅰ中分离得到化合物13和16;利用硅胶柱层析和重结晶法从组份c=Fr.Ⅱ中分离到化合物14和15;利用硅胶柱层析从组份c-Fr.Ⅲ中分离得到化合物7;利用硅胶柱层析从组份c-Fr.Ⅳ中分离得到化合物6、8和10;利用硅胶柱层析从组份c-Fr.Ⅴ中分离得到化合物5和12。火龙果花乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析(甲醇-氯仿为洗脱剂:0:100→100:0)分离得到五个组份e=Fr.Ⅰ、e-Fr.Ⅱ、e-Fr.Ⅲ、e-Fr.Ⅳ和e-Fr.Ⅴ。组份e-Fr.Ⅲ经硅胶柱层析分离,得化合物9和11;组份e-Fr.Ⅳ经硅胶柱层析、葡聚糖凝胶LH-20柱层析、反相C-18柱层析,得化合物2、3和4。正丁醇萃取物经硅胶柱层析(以甲醇-氯仿为洗脱剂:0:100→100:0)分离,经正相TLC合并相同流份,得到五个组份t-Fr.Ⅰ,t-Fr.Ⅱ,t-Fr.Ⅲ,t-Fr.Ⅳ和t-Fr.Ⅴ。组份t-Fr.Ⅴ经硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和反相C-18柱层析,得化合物1。本论文共分离得16个化合物,确定了15个化合物的结构,其中1个为新化合物。经过1H NMR、13C NMR、IR以及参考对照文献,这些化合物是:山奈酚3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1’’’’’’’→6’’’’’)-β-D-吡喃半乳糖基-(1’’’’’→6’’’’)-β—D-吡喃半乳糖基-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1’’’’’’→6’’’)-β-D-吡喃半乳糖基-(1’’’→6’’)-β-D-吡喃半乳糖苷(1)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、异鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(4)、尿嘧啶(5)、邻苯二甲酸二丁酯(6)、1-癸基-2-丁基邻苯二甲酸酯(7)、β-谷甾醇(8)、β-胡萝卜苷(9)、(14RS)-(10E,12E)-14-羟基-9-羰基-10,12-十八碳二烯酸(10)、二十三烷酸α-单甘油酯(11)、二十五烷酸(12)、二十四烷酸(13)、三十二烷酸(14)、三十烷醇(15)。检索SciFinder Scholar数据库检索,初步确定化合物1为新化合物,余下的1个化合物的结构,尚需进一步鉴定。本论文确定结构的化合物中,除化合物6和8外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。此外,本论文采用电喷雾多级串联质谱技术研究了7个黄酮类、5个三萜类和2个木脂素类化合物的特征质谱行为。根据一些特征的中性碎片丢失,总结了这些化合物在电喷雾质谱条件下的质谱裂解规律。结果发现这7个黄酮类化合物的二级以及多级质谱碎片较多,分子离子碎片都易失去CO和H2O,还常伴有失氢的情况。5个三萜类化合物在电喷雾电离条件下的多级质谱比较简单,连有-COOH的△12-齐墩果酸类和△12-熊果酸类易以[M-H]-的准分子离子峰形式存在,β-香树脂醇和β-香树脂酮易以[M+H]+的准分子离子峰形式存在;此外,我们所分析的两个木脂素类化合物在电喷雾电离条件下容易失去H+而带负电荷。
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