目的：宫颈癌(Cervical Cancer)是最常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率居女性恶性肿瘤的第二位,仅次于乳腺癌,其病理类型常见的有鳞癌、腺癌、腺鳞癌，其发病原因主要与以下因素有关：1.高危型HPV感染；2.性行为及分娩次数；3.沙眼衣原体、单纯疱疹病毒II型、滴虫等病原体的感染起着协同作用；4.吸烟以及营养不良、卫生条件差等。发病早期的宫颈癌常无明显的症状和体征，宫颈光滑或难与宫颈柱状上皮异位相鉴别。颈管型患者因宫颈外观正常易漏诊或误诊。其转移途径主要为直接蔓延及淋巴转移，血行转移较少见。在细胞代谢、DNA合成和修复以及癌细胞快速增殖分裂过程中叶酸发挥着重要作用，快速分裂癌细胞的DNA合成对于叶酸有很高的需求，所以近年来转运叶酸进入细胞内的叶酸受体α成为人们的研究热点。叶酸受体是一种膜结合蛋白，它在结合运输生理水平的叶酸到细胞内的过程中发挥着重要的作用，其在正常组织中低表达，在肿瘤细胞膜表面高度表达，叶酸受体（FR）分为FR-α、FR-β、FR-γ，其中FR-α高表达于黏液腺癌中，包括卵巢腺癌、子宫腺癌、宫颈腺癌、睾丸绒毛膜癌和某些脑肿瘤中，并且少量地表达于肾、结肠及心脏等癌症中。Ki-67是存在于增殖细胞核的与细胞增殖密切相关的核蛋白，作为评价细胞增殖的标记物，现已广泛地应用于肿瘤的研究和探讨中。本实验用免疫组织化学法（immunohistochemistry）检测宫颈癌组织中FR-α蛋白及Ki-67的表达，探讨二者的关系及其临床意义。方法：采用免疫组织化学PV法检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织以及宫颈癌组织中FR-α蛋白表达及Ki-67的表达。分实验组：宫颈癌33例（其中宫颈癌I期11例，宫颈癌II期12例，宫颈癌III期10例）。对照组：正常宫颈组织30例，宫颈上皮内瘤变组织42例，阳性表达判断：细胞胞浆内出现棕黄色颗粒为准，参考Soslow RA和刘祖国等[1][2]提到的方法，采用免疫组化评分法来判定结果，先按染色强度评分：未见染色为0分，淡黄色为1分,棕黄色为2分，棕褐色为3分；再按阳性细胞所占百分比评分：随机选取高倍镜（×200）下观察5个视野，每个视野计数100个细胞，进行阳性细胞数分级，0-1%=0，1-10%=1，10-50%=2，50-80%=3，80-100%=4)。两项评分乘积所得总分（IHS）进行结果判定：IHS0分为（-），IHS1~4分为（+），IHS5~8分为（++），IHS9~12分为（+++）。Ki-67结果判断：细胞胞浆内出现棕黄色颗粒为准，参考Soslow RA和刘祖国等[1][2]提到的方法，采用免疫组化评分法来判定结果，先按染色强度评分：未见染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；再按阳性细胞所占百分比评分：随机选取高倍镜（×200）下观察5个视野，每个视野计数100个细胞，行阳性细胞数分级，0-1%=0，1-10%=1，10-50%=2，50-80%=3，80-100%=4）。两项评分乘积所得总分（IHS）进行结果判定：IHS0分为（-），IHS1~4分为（+），IHS5~8分为（++），IHS9~12分为（+++）。所有数据采用SPSS13.0统计软件处理。计数资料采用χ2（PearsonChi-Square Test）或Fish确切概率法；两组变量间的相关分析采用Spearman等级相关分析。所有检验均为双侧，P＜0.05为有统计学意义。结果：1正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈癌组织中FR-α蛋白表达正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈癌组织中FR-α蛋白表达于细胞浆中，呈棕黄色颗粒。在本实验中，正常宫颈组织FR-α蛋白表达阳性率为6.7%，宫颈上皮内瘤变组织FR-α蛋白表达阳性率为76.2%，宫颈癌组织FR-α蛋白表达阳性率为81.7%，差异有统计学意义（P＜0.05），见table1。宫颈上皮内瘤变组织与正常组织中FR-α的表达阳性率相比，差异有统计学意义（P＜0.05），见table1。宫颈癌组织与宫颈上皮内瘤变组织中FR-α蛋白表达阳性率相比，差异无统计学意义（P>0.05），见table1。2不同病理类型中FR-α蛋白表达CINI、CINII、CINIII中FR-α蛋白表达有差异，三者相比无统计学意义（P>0.05）。见table2。宫颈癌I期、宫颈癌II期、宫颈癌III期蛋白表达有差异，三者差异无统计学意义（P>0.05）。见Table33FR-α蛋白表达与宫颈癌危险因素的相关性在宫颈癌组织及宫颈上皮内瘤变组织中，FR-α蛋白表达与年龄因素无关,年龄>40与年龄≤40两组差别无统计学意义（P>0.05），见Table4。在两组中，FR-α蛋白表达与HPV感染均有关,HPV感染阳性与HPV感染阴性两组差别有统计学意义（P<0.05），见Table4。4正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈癌组织中Ki-67表达正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈癌组织中Ki-67表达于细胞核中，呈棕黄色颗粒。在正常宫颈组织中未见Ki-67表达（见Fig.4），宫颈上皮内瘤变组织及宫颈癌组织中Ki-67表达升高（见Fig.5,Fig.6），正常宫颈组织中Ki-67阳性率0%，宫颈上皮内瘤变组织中Ki-67阳性率71.4%，宫颈癌病变组织中Ki-67阳性率84.8%，三者差异有统计学意义(P＜0.05)。见table5，正常宫颈组织与宫颈上皮内瘤变组织中Ki-67蛋白表达阳性率相比，两者差异有统计学意义（P<0.05）,宫颈上皮内瘤变组织与宫颈癌病变组织中Ki-67蛋白表达阳性率相比，两者差异无统计学意义（P>0.05）。见Table5。5不同病理类型中Ki-67表达CINI、CINII、CINIII蛋白表达有差异，三者相比差异无统计学意义（P>0.05）。见table6。宫颈癌I期、宫颈癌II期、宫颈癌III期Ki-67蛋白表达有差异，三者差异无统计学意义（P>0.05），见Table7。6Ki-67蛋白表达与宫颈癌危险因素的相关性在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中，Ki-67蛋白表达与年龄因素无关，年龄>40与年龄≤40两组差别无统计学意义（P>0.05），见Table8。在两组中Ki-67蛋白表达与HPV感染无关，HPV感染阳性与HPV感染阴性两组差别无统计学意义（P>0.05）,见Table8。7宫颈上皮内瘤变组织及宫颈癌组织中FR-α蛋白表达与Ki-67的关系：宫颈癌组织中二者呈正相关，相关系数r=0.532，p=0.000，有相关性，有统计学意义（P<0.05)。宫颈上皮内瘤变组织中，FR-α蛋白表达与Ki-67蛋白表达呈正相关，相关系数r=0.504，p=0.003，有相关性，有统计学意义（P<0.05）结论：1FR-α蛋白表达升高参与了宫颈癌发病。2FR-α蛋白表达与年龄因素无关，与HPV感染有协同作用。3Ki-67的高表达促进了肿瘤的发生，与HPV感染无协同作用。4宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中FR-α蛋白表达与Ki-67有相关性；FR-α蛋白可能通过影响细胞增殖参与宫颈癌的发生与发展。