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Inpp5f-v3(Inositol polyphosphate-5-phosphatase F-variant3)基因为父本表达的印记基因,定位在鼠7号染色体远端,为 Inpp5f基因的一个转录本变体。Inpp5f基因在小鼠中为双等位表达,编码肌醇磷酸酶,它与哺乳动物神经末梢的胞吞和胞吐相关,在脑组织发育过程中起到重要作用。本课题利用一些分子生物学技术来研究印记基因 Inpp5f-v3在小鼠脑组织发育过程中的表达情况,并分析 Inpp5f-v3的基本功能。首先针对 Inpp5f-v3基因的特异性第一外显子设计引物,通过 RT-PCR扩增片段;之后将片段连接入载体 pBluescript KSⅡ,构建 Inpp5f-v3/pBluescript KSⅡ重组质粒,合成地高辛标记的RNA探针。Northern杂交结果显示该基因仅在脑组织中存在一个2.7kb的转录本。通过原位杂交和实时定量 RT-PCR确定了 Inpp5f-v3基因在小鼠脑组织发育过程中的表达情况。在小鼠的胚胎发育阶段,Inpp5f-v3基因在嗅球、大脑皮层、后脑及小脑的外颗粒层(EGL, external germinal layer)表达量较高;而在小鼠出生后,表达量在整个小脑以及海马中有所增加。经过进一步分析发现 Inpp5f-v3基因主要表达在小脑的颗粒细胞和浦肯野氏细胞、海马CA1、CA2和CA3锥体细胞,齿状回的颗粒细胞等。另外,该基因在嗅球的颗粒细胞层、僧帽细胞层和球旁细胞中都有表达。这些结果表明,Inpp5f-v3基因的时空表达可能受到小鼠发育的调控,推测其可能与小鼠的脑及神经系统的发育相关,并可能与颗粒细胞的生长、分化及成熟有关。