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经过多年基础研究和临床实验,同种原位心脏移植已成为一种应用于临床治疗终末期心脏病的有效方法。目前,供心保存、外科手术技术、术后感染已不再是阻碍心脏移植成功的最主要因素。术后排斥反应,尤其是急性排斥反应对心脏移植成败以及对心脏移植病人的生存期、生存质量的影响显得越来越突出。因此,对心脏移植急性排斥反应的发生机制及其早期诊断方法的研究便显得尤为重要。许多研究表明,在同种心脏移植排斥反应过程中可见红、白细胞聚集于心肌细胞和血管内皮细胞周围,血管内大量红细胞聚集,白细胞和血小板附壁,血管腔隙变窄堵塞等微循环障碍。这些现象提示红细胞、白细胞流变学特性紊乱是与同种移植排斥反应及移植物失功相伴随的关键因素之一。而细胞流变学与急性排斥反应的因果关系及其发生机制目前尚不清楚。我们拟通过观察大鼠心脏移植术后急性排斥反应期间红、白细胞流变学特性的改变及其变化规律,初步探讨其与急性排斥反应的关系。 目的:观察大鼠同种心脏移植急性排斥反应前后红、白细胞流变学特性的变化规律,探索心脏移植中红、白细胞流变学特性改变与急性免疫排斥反应以及病理损伤的相关性,并为心脏移植急性排斥反应的诊断及防治开辟新的研究领域。 方法: 1.分组:健康雄性SD大鼠102只,Wistar大鼠24只。随机选取6只SD大鼠作为正常对照组,采集正常SD大鼠红白细胞流变学参数及心肌组织切片。手术创伤组(A组,SD大鼠24只);同系移植组(B组,供受体均为SD大鼠,共48只);同种移植组(C组,供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,各24只)。设立术后1,3,5,7天共4个观察点,术后大鼠随机进入各观察点,每个观察点6只大鼠。 2.动物模型制作:A组,大鼠肝素化后阻断腹主动脉及下腔静脉,不进行心脏移植,仅做血管切开及切口吻合,30min后开放阻断,关腹;B组和C组,以Ono术式为基础,局部加以改进,将供心的升主动脉和肺动脉分别与受体的腹主动脉和下腔静脉行端侧吻合,制作大鼠腹腔心脏移植模型。 3.病理学检查:抽取到达观察时间的术后大鼠血液样本后,摘除移植心脏,进行心肌组织病理学检查,并进行排斥反应病理分级。 4.红、白细胞流变学特性检测:测定红细胞电泳时间(erythrocyteeleetrophoresis time,EET)、红细胞聚集指数(erythroeyte aggregationindex,EAI)、红细胞变形指数( erythroeyte deformability index,EDI)及白细胞变形指数(leueocyte deformability index,LDI)。 5.实验数据采用SPSS10.0软件进行统计学处理。 结果: 1.移植心病理检查结果:B组移植心脏排斥反应分级均较轻;C组术后排斥反应较重。经统计学处理,同种移植组病理等级显著高于同系移植组(P<0.001)。 2.红白细胞流变学改变:①A组及B组之间各参数比较均无显著差异(P>0.05);A组、B组分别与C组之间各参数比较均有显著差异(P<0.001)。②红细胞电泳时间A组、B组及C组均与正常对照组无显著差异(P>0.05)。③A组及B组红细胞变形指数、聚集指数及白细胞变形指数在术后第1天出现不同程度的改变,但随后逐渐减轻,第3、5、7天与正常组比较均无显著差异(P>0.05)。④C组红细胞聚集指数及白细胞变形指数在术后各观察点均与正常组有显著差异,红细胞变形指数在术后第3、5天与正常组比较有显著差异(P<0.05)。 3.移植心脏病理分级与红细胞电泳时间的相关分析表明其与病理结果无显著相关(r=0.o“,P二0.658);与红细胞聚集指数(r=0.778,P<0.001)、红细胞变形指数(r=o.78,P<0.001)相关分析表明这两个参数与病理结果有密切的相关性;与白细胞变形指数的相关分析表明该指标与病理结果有显著相关,但相关性不密切(r=0.498,P<0.001)。 结论: 1、心脏移植手术创伤、缺血再灌注损伤可导致红细胞聚集性、白细胞变形性的改变,但主要在术后早期,持续时间较短、程度较轻。2、心脏移植手术创伤、缺血再灌注损伤以及急性排斥反应均未引起红细胞电泳时间的显著改变。3、较轻的排斥反应并未出现显著的细胞流变学改变;而当发生较为严重的排斥反应时,红细胞聚集性显著升高,红、白细胞变形性显著下降,是伴随较重排斥反应出现的重要现象。