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背景：铁是维持机体许多重要的代谢活动所必不可少的元素。然而近来的研究发现，铁超载在机体一些疾病（如动脉粥样硬化、心肌缺血／复灌性损伤、遗传性血色素病）的发展过程中起了重要的作用。动脉粥样硬化的发生和铁引起的氧化应激，平滑肌细胞增殖以及脂质过氧化有关。循环系统内铁的增加可能是导致冠脉粥样硬化病人血管舒张功能损伤的主要原因。然而，目前对于铁的增加引起内皮依赖性血管舒张功能改变的直接效应以及可能的机制并不清楚。此外，铁对血管收缩功能的影响目前仍不明确。 目的：本文主要观察铁对离体大鼠胸主动脉环的直接效应，以及铁对胸主动脉环收缩和舒张功能的影响，并探讨其可能的机制。 方法：采用血管环灌流装置测定离体大鼠胸主动脉环的KCI和苯肾上腺素（PE）的收缩效应，以及乙酰胆碱（ACh）血管舒张效应。具体方法如下。取雄性Sprague-Dawley大鼠的胸主动脉条上段，置于4℃的K-H液中，将血管剪成2～3mm长的主动脉环，部分血管环先用机械法去除血管内皮，迅速悬挂至离体灌流装置中。主动脉环稳定于37℃的K-H液中，溶液以95％O2+5％CO2饱和。逐步调节主动脉环张力至2g，用60mmol／L浓度的KCI刺激，待收缩幅度稳定后洗脱，共重复三次，以激发最大收缩。药物引起的收缩幅度均以第三次KCI引起的最大收缩幅度为相对标准值，用百分比值来表示。用10-6mol／L PE预收缩后，加入不同浓度的ACh、硝普钠（SNP）或L-精氨酸（L-Arg）， 浙江大学硕士学位论文 以各种浓度所致的舒张幅度达到PE所致的收缩幅度的百分比作血管舒张反应的量－效曲 线。各组资料以 me盯仕SE表t，采用 one－wnyANOVA以及 Newman－Keuls pOSt hoe test 做统计学分析。p＜0．05认为有显著差异。 实验结果： 第一部分，铁对血管收缩功能的影响（均选用去内皮的血管环）。 （l）100pmol几拘磅酸铁（Ferric ammonium citrate，FAC）对血管具有直按收缩效 应，可引起大鼠主动脉环发生相位性收缩。首先出现快速收缩期，最大收缩幅度可达 24刀15土2．3川，之后血管舒张并回到静息水平，整个过程约二十分钟。 （2）当细胞外液钙离于的浓度增加一倍，铁所致的血管环收缩幅度明显增加 （P＜0刀1），持续时间亦明显延长（＞60min）。主动脉环用硝苯毗咤（Nifedpine，Nif） 孵育 15min以阻断卜型钙通道后，再给予铁刺檄，与未加 Nif的同浓度细胞外钙离于组 相比，铁所致的收缩幅度均明显降低（均P＜0刀1），且高钙液中铁引起的相位性收缩幅 度明显高于正常钙组。 （）在细胞外液为无钙时，用 10‘mol／卜佛波酯（Phorbol 12，13－ibutyrate，PDBu） 收缩主动脉环，P＊BU所致的收缩幅度最大可达37．刀幻＊5％，稳定后给予F＊C （100pmol／L），此时主动脉环收缩幅度增加 49．1813．75％。 （4）铁使KCI所致的血管环收缩幅度显著降低。即未川铁孵育纠KCI引起血．管环 收缩为93．57士3．95％；而铁孵育30min后，KC！引起血管环收缩幅度降低为82二5士212 ％，两者有显著差异（p＜0刀1）。而铁孵育30min后，使PE引起的收缩量－效曲线右移 （p＜0．05）。二甲基亚矾（＊MSO）、过氧化氢酶和谷恍甘肽（osN）可明显降低铁对＊E 血管收缩反应的抑制作用（卜＜0刀5）。 第二部分，铁对血管舒张功能的影响（无特殊说明，均为内皮完整的血管环）。 门)主动脉环用铁孵育后，可显著降低ACh产生的内皮细胞依赖性主动脉环的舒 张作用。主动脉环用铁孵育之前，补充NO的前体物质卜－Arg，可增加血管对低浓度ACh 2 浙江大学硕士学位论文 （l”’mol／L）的舒张反应的程度。但＞10”’mollL时 ACh所致的血管舒张幅度与单纯铁孵 育组相比无明显差异，提示补充LAfg并未明显改善铁负荷引起血管舒张功能的下降。 （2）正常含有内皮的主动脉环在PE预收缩后，给予不同浓度的L－Afg可引起血管 舒张；铁孵育后，L－AFg引起的舒张幅度显著减小（P＜0刀5）。无内皮的主动脉环给予 NO的供体一SNP，使PE预收缩的血管舒张；FAC孵育后，对SNP产生的血管舒张作 用无明显影响。 （3）DMSO对铁抑制ACh血管舒张的作用无明显影响：主动脉环用CAT孵育30 min 后，再加入FAC共同孵育，发现与单纯铁处理组相比，在ACh浓度j］ 10－’、10‘、3x10“‘M 时，血管的舒张幅度有显著增加（P小刀1）：GSH可明显对抗铁对＊o血管舒张作用的 抑制。 （4）正常大鼠主动脉中NOS活性为