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[目的]文献报道,B4GALT3基因在结肠癌,宫颈癌,神经母细胞瘤等细胞中表达异常并调控它们的生物学行为。为了探究B4GALT3在胃癌细胞中是否也能调控其生物学行为,课题组前期证实了该基因在BGC823和SGC7901这两株胃癌细胞中高表达,所以本课题进一步探讨用siRNA干扰该基因后对BGC823和SGC7901两株胃癌细胞生物学行为的影响,为今后胃癌的临床治疗提供理论依据。[方法]1.设计合成三对B4GALT3 siRNAs序列;2.Western Blot从三对B4GALT3 siRNAs中筛选下调B4GALT3基因最显著的一对siRNA及浓度;3.将筛选出来的B4GALT3 siRNA分别瞬时转染进BGC823和SGC7901两株胃癌细胞,并通过划痕实验和transwell迁移侵袭实验检测两株胃癌细胞BGC823和SGC7901的迁移和侵袭能力,通过MTT实验检测两株胃癌细胞BGC823和SGC7901的增殖活性;4.Western Blot检测下调B4GALT3基因后对E-cadherin等EMT相关蛋白的表达情况的影响。[结果]1.成功构建三对siRNAs序列;2.Western Blot实验筛选结果显示:B4GALT3 siRNAs序列干扰B4GALT3成功,GGAGGAGTCTCAGCACTTA为最佳干扰序列,且最佳干扰浓度为8μM。3.划痕实验结果显示:下调B4GALT3基因后,BGC823和SGC7901两株胃癌细胞迁移距离均减小,P<0.05,差异具有统计学意义,表明下调B4GALT3基因能抑制这两株胃癌细胞的迁移速率;Transwell迁移实验结果显示:下调B4GALT3基因后,BGC823和SGC7901两株胃癌细胞迁移能力降低,P<0.05,差异具有统计学意义,表明下调B4GALT3基因能抑制这两株胃癌细胞的迁移能力;Transwell侵袭实验结果显示:下调B4GALT3基因后,BGC823和SGC7901两株胃癌细胞的侵袭能力下降,P<0.05,差异具有统计学意义,表明下调B4GALT3基因能抑制这两株胃癌细胞的侵袭能力。4.MTT实验结果显示:下调B4GALT3基因后,BGC823和SGC7901两株胃癌细胞增殖活性减弱,P<0.05,差异具有统计学意义,表明下调B4GALT3基因能抑制这两株胃癌细胞的增殖活性。5.EMT实验结果显示:下调B4GALT3基因后,BGC823和SGC7901两株胃癌细胞中EMT相关蛋白表达情况结果显示:转染组(转染siRNA1)相对于control组和siCTL组Claudin-1蛋白和E-cadherin蛋白的表达水平明显降低,P<0.05,差异具有统计学意义;而Vimentin、Slug和β-catenin的蛋白表达水平显著增加,P<0.05,差异具有统计学意义。结果表明:下调B4GALT3基因的表达能影响两株胃癌细胞EMT。[结论]siRNA干扰B4GALT3基因的表达能抑制胃癌细胞BGC823和SGC7901迁移,侵袭,增殖能力,具体机制可能与EMT相关。