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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是一种由镰刀菌属产生的具有雌激素作用的真菌毒素。在温暖潮湿的环境下,ZEN会污染玉米、小麦、大麦等农作物,其中在玉米中的污染最为常见。ZEN作为真菌毒素之一,具有很强的毒性,在动物体内有一定的残留和蓄积,且毒素不易排出体外,对食品安全和人体健康造成了严重的威胁。免疫层析方法(Lateral Flow Immunoassay,LFIA)因其简便、快速以及成本低等优点,被广泛应用于体外诊断、食品安全、环境监测等领域。信号标记物是影响LFIA性能尤其是灵敏度的关键因素之一。胶体金纳米粒子(Gold Nanoparticles,AuNPs)作为一种颜色呈现红色、生物相容性好以及摩尔消光系数较高的标记物,近年来被广泛应用于免疫学检测。但是AuNPs颜色亮度不深且其胶体稳定性较差造成胶体金免疫层析方法(Colloidal Gold Immunoassay,CGIA)的检测灵敏度较低。因此,建立一种快速灵敏的方法来检测食品和饲料中微量的ZEN具有重要意义。第一章中,首先我们对检测目标物ZEN做了简要概述,其中包括ZEN的理化性质、危害和限量标准以及目前常用的ZEN残留检测方法。其次概括性地介绍了 LFIA,并探讨了提高其检测灵敏度的策略;最后,简明扼要地介绍了本文引入的新材料聚多巴胺(Polydopamine,PDA),包括PDA的性质和应用。第二章中,我们建立了一种传统的CGIA检测玉米中的ZEN。通过对AuNPs标记抗体的pH、检测线(T线)上全抗原(ZEN-BSA)浓度以及抗ZEN单克隆抗体(anti-ZEN monoclonal antibody,mAb)浓度的优化,建立了 T线信号强度与ZEN浓度的标准曲线。结果显示:本方法用于检测玉米中的ZEN,定性裸眼判断阈值为2.5 ng/mL,定量检测限(limit of detection,LOD)及线性范围分别为76.1 pg/mL 及 0.1-10 ng/mL。第三章中,我们建立了一种基于PDA介导的CGIA检测玉米中的ZEN。多巴胺(Dopamine,DA)在胶体金表面氧化自聚合形成PDA包被的胶体金纳米颗粒(PDA-coated AuNPs,Au@PDA)。然后对Au@PDA的合成条件,包括合成溶液的pH,3%H2O2和DA的体积进行了优化,通过紫外可见光谱、Zeta电位、透射电子显微镜表征,表明Au@PDA-10的摩尔消光系数最高(是AuNPs的1.68倍),抗体偶联效率高,稳定性好(可抗高盐和强碱环境),有利于提高传统的CGIA检测灵敏度。以Au@PDA-10为标记物,优化了 6个重要的实验参数,得到了最佳工作参数:封闭剂为1%酪蛋白,抗体标记pH为7,mAb浓度为2.5μg/mL,ZEN-BSA浓度为2.5 mg/mL,探针添加量为2.5 μL,免疫反应时间为30 min。本方法所用的mAb用量比传统的CGIA节省1倍,显著降低了检测成本。在最优条件下建立了标准曲线,结果表明:本方法定性裸眼判断阈值为1.0 ng/mL,LOD及线性范围分别为7.4 pg/mL及0.01-5 ng/mL,定量检测灵敏度是传统的CGIA的10倍。本方法加标回收率为93.80%-111.82%,CV值在1.08%-9.04%之间,稳定性良好。用高效液相色谱法和本方法同时检测20个玉米样本,CV值在2.91%-6.08%之间,表明该方法在实际样本检测方面具有较大的潜力。第四章对全文工作进行了总结和展望。对本文建立的两种检测ZEN的LFIA做了系统性的阐述,从多角度证明本文建立的两种LFIA对检测ZEN及其它真菌毒素具有一定的指导意义,对提升LFIA的灵敏度以及其它性能提出了新的思路和方法。