背景:糖尿病是当今威胁全球公共卫生健康的严峻挑战,其中,糖尿病肾脏疾病（Diabetic kidney disease,DKD）系造成糖尿病不良结局的严重并发症之一。研究显示肾小球系膜细胞细胞外基质异常聚集导致肾小球硬化及相关功能丧失是DKD进展的重要环节。近期的研究表明,胰高血糖素样肽-1（Glucagon like peptide-1,GLP-1）受体激动剂具有肾脏保护作用,但具体机制尚未明了。我们的前期研究发现钙库操控性钙通道可抑制肾小球系膜细胞产生细胞外基质蛋白,本课题旨在进一步研究高糖状态下GLP-1受体激动剂是否具有抑制肾小球系膜细胞产生细胞外基质蛋白的作用,以及此种作用是否与GLP-1受体和/或钙库操控性钙通道的激活有关,以期探讨GLP-1受体激动剂对糖尿病肾脏病变的干预作用。目的:1.观察在高糖状态下GLP-1受体激动剂利拉鲁肽（Liraglutide）和艾塞那肽（Exendin-4）是否具有抑制肾小球系膜细胞细胞外基质蛋白产生的作用;2.研究利拉鲁肽对高糖诱导的肾小球系膜细胞钙库操控性钙通道（Store-operated calcium channels,SOC）蛋白及其相关功能的影响,以及与抑制细胞外基质蛋白异常增生的关系;3.探讨利拉鲁肽对高糖诱导的肾小球系膜细胞GLP-1受体的影响,以及与SOC和细胞外基质蛋白产生之间的关系。方法:1.在高糖状态下应用不同浓度的GLP-1受体激动剂利拉鲁肽培养人肾小球系膜细胞,并通过免疫印迹试验（Western blot）检测细胞外基质蛋白纤连蛋白（Fibronectin,FN）和胶原蛋白IV（Collagen IV,Col IV）的表达;然后观察另一种GLP-1R激动剂Exendin-4在高糖状态下对人肾小球系膜细胞细胞外基质蛋白表达的影响;2.应用不同浓度的利拉鲁肽在高糖状态下培养人肾小球系膜细胞,通过Western blot检测SOC重要通道蛋白Orai1的表达,并应用细胞内钙成像检测钙库操控性钙内流以评估SOC活性,然后通过SOC特异性抑制剂GSK-7975A抑制SOC功能进而观察利拉鲁肽对高糖诱导的细胞外基质蛋白产生的变化;3.应用Western blot检测高糖状态下不同浓度的利拉鲁肽培养人肾小球系膜细胞后GLP-1受体蛋白的表达;然后应用GLP-1受体拮抗剂Exendin 9-39抑制GLP-1受体进而观察100n M利拉鲁肽对高糖诱导人肾小球系膜细胞细胞外基质蛋白产生及SOC通道蛋白Orai1表达的影响。4.运用SPSS 20.0软件进行统计分析。所有数据均以均数±标准差（Mean±SEM）表示,两组间比较采用配对t检验,多组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.高糖能刺激肾小球系膜细胞细胞外基质蛋白产生,应用利拉鲁肽干预48小时可降低FN和Col IV蛋白的表达,并具有一定的浓度依赖性;另一种GLP-1受体激动剂Exendin-4也减弱了高糖刺激的FN和Col IV的异常增多;2.高糖干预肾小球系膜细胞8小时和24小时均可抑制Orai1蛋白表达;利拉鲁肽治疗可以上调高糖刺激的Orai1蛋白的表达减少,干预24小时时这种现象更明显,并具有一定的浓度依赖性;3.高糖干预肾小球系膜细胞24小时可明显抑制钙库操控性钙内流,而利拉鲁肽治疗显著减弱了高糖对钙库操控性钙内流的抑制作用;4.在高糖状态下SOC抑制剂GSK-7975A联合利拉鲁肽治疗48小时,利拉鲁肽对高糖刺激肾小球系膜细胞FN和Col IV蛋白表达的抑制作用被显著减弱;5.高糖状态下肾小球系膜细胞的GLP-1受体蛋白表达出现明显减低,应用利拉鲁肽干预48小时可改善GLP-1受体蛋白的表达,并具有一定的浓度依赖性;6.在存在GLP-1受体拮抗剂Exendin 9-39的情况下,利拉鲁肽干预高糖刺激的肾小球系膜细胞使SOC通道蛋白Orai1表达增加的作用也被显著弱化,同样使细胞外基质蛋白（FN和Col IV）表达减少的作用被明显抑制。结论:1.GLP-1受体激动剂通过恢复SOC功能来抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞中细胞外基质蛋白的异常增加。2.GLP-1受体激动剂通过增加高糖诱导的肾小球系膜细胞中GLP-1受体的表达从而改善SOC功能和抑制细胞外基质蛋白的产生。