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本论文由综述和研究报告两部分组成。第一部分为综述部分,第二部分为研究报告部分。其中,研究报告由三个实验体系组成。综述部分简要简介了电致化学发光(ECL)反应的基本原理和基本条件,重点介绍了ECL分析法主要的体系;最后简要概括了蛋白质激酶的现实意义以及现存的各种检测方法。研究报告主要包括以下几方面的工作内容:1.首次基于一种简单和绿色的一步自聚合法将聚去甲肾上腺素(PNE)修饰到石英毛细管内壁,用于分离氨基酸对映异构体,且将毛细管电色谱与电致化学发光法联用(CEC-ECL)。并通过扫描电镜、紫外-可见分光光谱和接触角表征了PNE粘附层的形成。与裸的毛细管相比,修饰后的毛细管具有更好的亲水性、对氨基酸具有更小的非特异性吸附,且使得组氨酸、苯丙氨酸和缬氨酸对映体分离度分别为1.6,1.8和1.6。2.基于酶功能化的金纳米探针的信号放大和亲和素与生物素体系的信号转换,构建了一个新颖的ECL生物传感器检测激酶活性及其抑制剂。纳米探针的制备是将biotin-DNA和葡萄糖氧化酶(GO x)共轭修饰到Au NPs上。同时,通过特异性的抗原-抗体作用将生物素化的抗磷酸化丝氨酸抗体绑定到磷酸化位点。在生物素和亲和素的作用下,纳米探针能结合到电极表面的磷酸化位点上,当ECL反应发生在鲁米诺ECL生物传感器中时,组装到纳米探针上的GOx能催化氧化葡萄糖产生H2O2,促进鲁米诺的ECL。所提出的ECL生物传感器提供了一个高灵敏,低的检测限,宽的线性范围和良好的稳定性的方法用来检测蛋白质激酶A(PKA)活性。而且,这个生物传感器也被用于定量分析激酶抑制剂。3.首次我们在ECL生物传感器中研究了一种新颖且通用的ECL-RET方法,通过氧化石墨烯(GO)和石墨烯量子点(GQDs)之间的能量转移作用证明了这种方法在灵敏的检测蛋白质激酶及其抑制剂的可行性。通过特异的抗原-抗体作用将单克隆抗体共轭的GO绑定到电极上的磷酸化丝氨酸位点,这样就将GO和GQDs之间的距离拉近,利于GQDs的发光猝灭。提出的ECL-RET生物传感器展现了高灵敏度,低检测限,宽线性范围和良好稳定性。这种新颖方法有望开辟一种新的思路发展ECL-RET技术,且提高碳纳米材料在免疫检测中的应用。