Dechlorane 602对mLTC-1细胞活性和类固醇激素合成的影响及机制研究

来源 :大连海事大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haizhiren
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Dechlorane 602(Dechlorane 602,Dec 602)是一种氯代环戊二烯类化合物,与Dechlorane(Dechlorane Plus,DP)具有相似的化学结构,二者均为广泛使用的阻燃剂,且都具有环境持久性有机污染物的特性,但Dec 602生物富集能力比DP更强。本课题组前期研究发现Dec 602与DP均对人乳腺癌细胞MCF-7产生类雌激素效应,且Dec 602的效应要强于DP。环境浓度DP在小鼠睾丸间质细胞mLTC-1中表现出复杂的双相内分泌干扰效应,Dec 602是否对雄性生殖细胞也存在相同或相似的效应目前尚未见报道。本论文采用环境相关浓度Dec 602(10-9~10-5 M)暴露处理小鼠睾丸间质细胞mLTC-1,MTT法检测暴露24、48、72和96小时后的细胞活性。在此基础上,选取显著影响细胞活性的Dec 602浓度再次进行暴露处理,通过RT-qPCR和Western Blot定量分析参与胆固醇转运(LHR和StAR)、类固醇激素合成(CYP11A1、CYP17A1、HSD3B1和HSD17B3)及类固醇合成调控通路(c AMP/PKA和IGF/MAPK/ERK)的相关分子,探究Dec 602对雄性生殖细胞毒性及激素合成影响的分子机制。细胞活性实验表明,环境相关浓度Dec 602对mLTC-1细胞产生双相内分泌干扰效应,10-5 M Dec 602显著抑制细胞增殖,表现出类雌激素效应;而10-9 M Dec 602显著促进细胞增殖,表现出类雄激素效应。对分子机制的研究表明,10-5M Dec 602暴露不会影响胆固醇向线粒体内膜转运的过程,但可以通过下调表达与睾酮合成相关的三个酶CYP11A1、HSD3B1和HSD17B3,抑制mLTC-1细胞增殖,从而表现出类雌激素作用;而10-9M Dec 602暴露可通过上调表达与胆固醇转运相关的LHR及与睾酮合成相关的四个酶CYP11A1、CYP17A1、HSD3B1和HSD17B3,磷酸化激活c AMP/PKA和IGF/MAPK/ERK通路,促进mLTC-1细胞增殖,从而表现类雄激素作用。本论文通过体外(in vitro)实验证明环境相关浓度Dec 602可能对雄性生殖细胞产生内分泌干扰效应,并从胆固醇转运、类固醇激素合成及调控三个方面探讨了可能的分子机制,为客观评价环境浓度Dec 602对雄性生殖的潜在危害提供了基础数据。
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