目的:探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）与树枝状两亲性多肽（B-PA）自组装水凝胶共培养,观察细胞的生物相容性、细胞的生长状态、细胞粘附性能及诱导骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化情况。为水凝胶支架植入治疗脊髓损伤的患者提供理论可行性。方法:1.应用全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞（BMSCs）,用倒置相差显微镜观察细胞分化及形态改变,针对骨髓间充质干细胞进行鉴定采用流式细胞术,大鼠选择3-4周龄SD大鼠（Sprague Dawley）。2.采用固相自动多肽合成仪（Solid-phase peptid synthesis,SPPS）合成含有IKVAV（I-异亮氨酸,K-赖氨酸,V-缬氨酸,A-丙氨酸,V-缬氨酸）和RGD（R-精氨酸,G-甘氨酸,D-天冬氨酸）连接的B-PA,并运用高效液相色谱（HPLC）与质谱仪（MS）对其进行表征。配制1%质量分数B-PA溶液加入等体积的DMEM/F12数秒钟后自组装成半透明的水凝胶,并用透射电镜显微（TEM）观察自组装水凝胶内部结构。3.采用死活细胞检测试剂Calcein-AM和PI对共同培养的B-PA自组装水凝胶与骨髓间充质干细胞进行双标染色,用荧光显微镜观察B-PA自组装水凝胶内骨髓间充质干细胞存活情况。检测不同浓度的B-PA水凝胶对骨髓间充质干细胞的细胞增殖和细胞毒性作用可采用CCK-8法。将实验分为三组:含PLL（多聚赖氨酸）、组IKVAV凝胶组、B-PA自组装水凝胶组,与密度为1000个cell/cm~2骨髓间充质干细胞共培养,用Hochest 33342染色检测细胞粘附能力。4.经过7天培养B-PA自组装水凝胶与骨髓间充质干细胞,利用免疫荧光检测其细胞分化为表达MAP-2、NF、GFAP标记物的神经细胞。结果:1.在倒置显微镜下观察传代培养至第三代大鼠骨髓间充质干细胞,细胞形态呈长梭形,旋涡状排列,有塑料贴附性,传代细胞生长速度快,流式结果表明CD29阳性细胞比率97.8%%,CD44阳性细胞比率99.8%;CD34阳性比率1.61%,CD45阳性细胞比率1.71%。2.B-PA设计序列:C16H31O-K-RGD K-IKVAV。高效液相色谱（HPLC）纯化并检测多肽纯度为95.8507%,质谱仪（MS）测得合成B-PA分子量为MW 2191.72,与其理论值一致。TEM结果示B-PA自组装水凝胶由纳米纤维构成,呈网状相互交叉,纳米纤维直径6～8nm,长度在100～500nm之间。3.将骨髓间充质干细胞置入1%质量分数B-PA自组装水凝胶复合培养1天,3天,7天后,用Calcein-AM/PI（活死细胞染色）进行染色,在荧光显微镜下对活死细胞进行计数,结果发现随着时间的增加,存活细胞的数目明显增加,并且死亡细胞的数目明显减少。使用酶标仪在450nm波长下检测CCK-8的吸光度,其中A、B、C和D组在1、3、7天都是成增长趋势,光密度（OD）值的增加与培养时间和B-PA浓度呈正相关。A、B、C和D组（P>0.05）之间的OD值没有显著差异。但是,E组的OD值最低。将含PLL（多聚赖氨酸）、组IKVAV凝胶组、B-PA自组装水凝胶组,与密度为1000个cell/cm~2骨髓间充质干细胞共培养。2h、4h、6h后清洗,三组都的细胞粘附数量（P<0.05）都随着时间增加而增加,在B-PA组达到顶峰。并且,粘附细胞的数量在2至4小时之间显著增加。4.将骨髓间充质干细胞接种在B-PA自组装水凝胶培育7天后,使用免疫荧光显微镜检测,表达标记的细胞MAP-2和NF显示红色荧光,表达标记GFAP的细胞显示绿色荧光,表明B-PA水凝胶可诱导骨髓间充质干细胞分化成神经元和胶质细胞。结论:1.B-PA自组装水凝胶的良好细胞相容性、促进细胞增殖和粘附、易修饰等特点值得肯定;2.B-PA水凝胶可诱导骨髓间充质干细胞分化成神经元和胶质细胞。