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本文就牛卵母细胞玻璃化冷冻保存以及冷冻胚胎移植黄牛进行了研究。 一、牛卵母细胞玻璃化冷冻研究 以二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(EG)作为冷冻保护剂,分别用0.25mL细管和OPS冷冻体外成熟的牛卵母细胞。解冻后进行孤雌激活。试验1:以DMSO+EG作为冷冻液,分别用0.25mL细管和OPS冷冻培养22h的卵母细胞,解冻后继续培养2h,进行孤雌激活。解冻后其形态完整率分别为90.6%和83.2%,差异不显著(P>0.05),卵裂率分别为32.3%和25.2%,差异也不显著(P>0.05);试验2:将成熟培养22h的卵母细胞分别在4%EG中平衡15min,或在10%EG中平衡10min后,移入35%EG+5%PVP中30s,用OPS进行冷冻。解冻后继续培养2h,进行孤雌激活。解冻后其形态完整率分别为79.4%和62.2%,差异显著(P<0.05),卵裂率分别为26.5%和10.5%,差异显著(P<0.05):试验3:分别用DMSO+EG和35%EG作为冷冻液,用OPS冷冻成熟培养22h的卵母细胞,解冻后继续培养2h,进行孤雌激活。解冻后其形态完整率分别为83.2%和79.4%,差异不显著(P>0.05),卵裂率分别为25.2%和26.55%,差异不显著(P>0.05)。以DMSO+EG或35%EG+5%PVP作为冷冻液,以0.25mL细管和OPS冷冻牛卵母细胞均能取得理想的效果。在4%EG中预平衡的卵母细胞比在10%EG中预处理的冷冻效果好。 二、进口冷冻奶牛胚胎移植黄牛试验 本试验以两种不同的同期发情方法,利用黄牛作为胚胎移植受体,移植冷冻进口奶牛IVF胚胎.试验1:一次PG法。受体牛注射一次氯前列醇钠(0.6mg);试验2:GnRH-PG法。受体牛先注射0.6mg氯前列醇钠,9天后第一次注射LHRH-A~375μg,注射之日为第0天,第7天注射0.6mg氯前列醇钠,48h后第二次注射LHRH-A~375μg。同期发情的黄牛经直肠触诊黄体合格后,移植进口冷冻奶牛IVF胚胎。第1组和第2组的同期发情率分别为60.0%(9/15)和63.2%(12/19),可移植率分别为26.7%(4/15)和36.8%(7/19),两组差异均不显著(P>0.05)。妊娠率分别为0和28.6%,差异显著(P<0.05)。结果表明,GnRH-PG处理效果较好,可以在生产中推广应用。