与啮齿类动物相比，树鼩无论在遗传进化地位还是生理生化特征上都非常接近于灵长类。在生物医学研究中也有着诸多优势，包括体型小，易操作，价格适宜，生长周期短等。然而，一直以来，遗传操作手段的缺失制约了树鼩作为实验动物的广泛应用与发展。在小鼠和大鼠上利用精原干细胞在体外长期培养，并进行精细复杂的基因编辑成功构建转基因动物的方法已经应用十余年。因此，本研究着重描述一种可以对树鼩精原干细胞进行长期体外培养的方法，这些体外培养的树鼩精原干细胞经过长期传代可以维持细胞干性和基本的精原干细胞特征。通过对不同物种间精原干细胞的保守标记基因的分析，筛选发现Thy1作为细胞表面标记分子，可以成功富集到树鼩睾丸中的精原干细胞。同时，通过转录组测序分析发现，Wnt/β-catenin信号通路对于最初精原干细胞的体外培养，促进精原干细胞适应体外环境具有重要的作用。同时，在树鼩精原干细胞的培养过程中，利用树鼩睾丸支持细胞作为饲养层对于树鼩精原干细胞系的建立及长期的体外培养至关重要。将可以体外培养稳定传代的精原干细胞利用慢病毒感染的方法标记上增强绿色荧光蛋白(EGFP)，并将这些标记有EGFP的树鼩精原干细胞通过体外移植的方法注射到已经清除体内生殖细胞的受体树鼩体内。经过一段时间后检查发现，这些有EGFP标记的细胞可以在受体体内进行自我更新并使受体树鼩重新产生精子。同时，利用这些受体树鼩与野生型雌性树鼩进行交配，可以得到有健康的转基因子代树鼩。至此，利用树鼩精原干细胞体外可持续传代体系的建立与基因修饰方法的应用，为解决树鼩的遗传操作手段开辟了崭新的道路，为树鼩作为实验动物的广泛应用点亮了曙光。　　最后，我们对树鼩精原干细胞进行了转录组和小RNA的测序并进行初步常规分析，希望为之后树鼩与灵长类的亲缘关系解析以及探讨雄性不育问题拓展其应用探路。