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海南黑山羊是宝贵的热带种质资源,但其繁殖效率较低。本研究通过测定繁殖周期(乏情期、发情期、妊娠期、泌乳期)海南黑山羊的血液理化指标和生殖激素水平,分析处于不同繁殖阶段母羊机体理化特性的差异,为后期蛋白组信息的分析提供参考依据;采用iTRAQ技术对繁殖周期海南黑山羊的血清蛋白组信息进行高通量分析,筛选与繁殖相关的差异表达蛋白,为海南黑山羊的科学饲养管理和扩繁等研究提供理论基础。主要结果如下:1、繁殖周期海南黑山羊血液理化指标测定结果显示:发情母羊血液中WBC、HGB含量均显著高于妊娠母羊,MCH、MCHC在妊娠期水平显著低于非妊娠期;妊娠母羊血清中TBIL、TG、CHO的分泌水平均显著高于非妊娠期;提示了在日常饲养管理中应注意母羊抗炎、日粮营养均衡等问题。生殖激素的测定结果显示:FSH与LH分泌趋势一致,在发情期分泌水平上升,进入妊娠期、泌乳期持续下降;E2进入妊娠期后分泌量减少,泌乳期过后分泌量逐渐恢复;P4妊娠期分泌水平显著高于非妊娠时期;PRL各个时期分泌变化不显著;揭示了海南黑山羊繁殖周期生殖激素的分泌规律。2、iTRAQ实验与生物信息学分析结果显示:共鉴定到5745条肽段和1213个蛋白,以Fold change>1.2和Q-value<0.05两个条件进行差异表达蛋白筛选,发情期/乏情期上调75个蛋白,下调66个蛋白;妊娠期/发情期上调和下调蛋白数目分别为101个和69个;泌乳期/妊娠期上调58个、下调101个蛋白;对差异表达蛋白结果进行进一步分析,共筛选出 APOC-II X2、FIX、C4BPα X4、LECT2、HABP2 X2 五个在发情期/乏情期、妊娠期/发情期、泌乳期/妊娠期中均差异表达的连续差异表达蛋白。初步揭示海南黑山羊繁殖周期各阶段之间差异蛋白信息,为海南黑山羊高效繁育体系的构建提供了理论依据。3、对差异表达蛋白进行KEGG Pathway富集分析,结果显示:繁殖周期中富集到最高数目差异表达蛋白的通路是补体和凝血级联,分别是36(乏情期/发情期)、30(妊娠期/发情期)、22(泌乳期/妊娠期);RF(富集因子,表示注释到该Pathway差异蛋白比例)最大的通路分别为范可尼贫血通路(乏情期/发情期)、p53信号通路(妊娠期/发情期、泌乳期/妊娠期)。基于GO分析筛选出Pre-IGFBP2、ANTXR2、Ran、SFRP3、β4GalT1、Pre-SAA21、vWF七个差异表达蛋白功能与繁殖相关,表明不同繁殖阶段的海南黑山羊母羊在细胞增殖与凋亡、黏附与迁移、营养物质代谢、免疫与炎症多方面均有变化。