光合细菌生物代谢斑蝥的制备工艺研究及动力学初析

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斑蝥光合细菌代谢液以优选的有益光合细菌作为菌种,加入到中药提取液中,再按照现代发酵工艺制成产品,是一种含有中药活性成分、菌体及其代谢产物的全组分发酵液的新型中药发酵加工制剂。本研究将现代生物技术与传统中药有机地结合起来,将光合细菌引入到斑蝥提取液中进行发酵代谢,通过光合细菌的生物转化功能和自身营养价值的利用,以强强联合的方式,挖掘出传统中药方剂的潜在药用价值。本研究首先完成了斑蝥素含量测定的方法学研究,确定了样品制备方法及含量测定的气相色谱条件。并以斑蝥素浸出量为考察指标,以三氯甲烷用量、酸水用量、提取时间作为考察因素,设计了L9(34)正交试验。实验结果得出:氯仿用量分别为斑蝥生药量的10倍,8倍;酸水用量分别为生药量的6倍,4倍;提取时间分别为1.5,1h,水浴提取两次为最佳工艺条件。然后分别以斑蝥水提液浓度、代谢pH值、代谢时间、接种量为因素,设计了L9(34)正交试验。由试验结果得出,No.4为斑蝥光合细菌代谢液制备工艺的最佳条件,为全面深入地开展斑蝥光合菌代谢液的药理学和化学成分研究奠定了可靠的基础。本章同时对斑蝥光合菌代谢液中光合菌浓度与OD的关系进行了研究,为斑蝥光合菌代谢液的代谢过程监控提供了良好的方法。斑蝥中的主要药效成分与毒性成分都是斑蝥素,光合菌对斑蝥药材有没有增效减毒作用主要看是不是能够以斑蝥素为底物进行生物代谢,进一步通过测定斑蝥素的含量以证明斑蝥素能够被光合菌作为底物,被光合细菌生物代谢,并对光合细菌对斑蝥素代谢动力学进行了初步分析。中药采用微生物发酵法进行制备,具有一般方法所无法比拟的优势,可以为开发新药、提高药物疗效、降低药物毒副作用的研究提供新的手段,为中药的发展开辟新的研究空间。进行中药发酵研究也具有成熟的现实条件,应当成为我国中药现代化研究的内容之一,从而更好地为人类服务。
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