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第一部分AngⅣ对糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶表达及认知功能的影响目的:观察血管紧张素Ⅳ(angiotensinⅣ,AngⅣ)对糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶(acetyltransferase ,ChAT)表达及认知功能的影响。方法:52只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(C组)10只、糖尿病组(D组)14只,糖尿病+AngⅣ组(E组)14只,糖尿病+AngⅣ+ divalinal-AngIV组(F组)14只,建立STZ糖尿病大鼠模型。成模后第12周,Morris水迷宫测试各组大鼠学习和记忆能力。测试结束后E组大鼠侧脑室注射AngⅣ5nmol/只/天(1 nmol/uL),F组侧脑室注射AngⅣ5nmol/只/天(1 nmol/uL)+ divalinal-AngIV 5nmol/只/天(1 nmol/uL),C组和D组注射等体积的生理盐水,持续1周,各组大鼠再进行Morris水迷宫测试。处死大鼠,取材,免疫组化观察大鼠海马ChAT蛋白水平的表达,RT-PCR和原位杂交法检测ChAT mRNA水平的表达。结果:Morris水迷宫测试结果显示:干预前:与C组相比, D组、E组、F组中心区域停留时间百分比和通过原平台次数明显减少,逃避潜伏期显著延长。干预后:与D组相比,E组中心区域停留时间百分比及通过原平台次数明显增加,逃避潜伏期明显缩短。与D组相比,F组上述指标无改善。免疫组化结果显示:与C组相比,D组海马ChAT阳性神经元平均光密度明显降低;与D组相比,E组海马ChAT阳性神经元平均光密度明显增加;与D组相比,F组海马ChAT阳性神经元平均光密度无明显改变。RT-PCR和原位杂交结果显示:与C组比较,D组海马ChAT mRNA表达水平显著降低;与D组相比,E组海马ChAT mRNA表达水平明显增加,同样,F组与D组比较无明显差异。结论:1、成模12周后的糖尿病大鼠,学习和记忆功能明显减退;AngⅣ可以显著改善糖尿病大鼠的学习和记忆功能。2、糖尿病大鼠海马ChAT mRNA和蛋白表达水平明显下降,AngIV可以上调ChAT mRNA和蛋白表达水平。3、AngⅣ改善糖尿病大鼠认知功能至少部分与其上调海马ChAT表达有关。第二部分血管紧张素Ⅳ对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及认知功能的影响目的:观察血管紧张素Ⅳ(angiotensinⅣ,AngⅣ)对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及认知功能的影响。方法:52只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(C组)10只、糖尿病组(D组)14只,糖尿病+AngⅣ组(E组)14只,糖尿病+AngⅣ+ divalinal-AngIV组(F组)14只,建立STZ糖尿病大鼠模型。成模后第12周,Morris水迷宫测试各组大鼠学习和记忆能力,测试结束后E组大鼠侧脑室注射AngⅣ5nmol/只/天(1 nmol/uL),F组侧脑室注射AngⅣ5nmol/只/天(1 nmol/uL)+ divalinal-AngIV 5nmol/只/天(1 nmol/uL),C组和D组注射等体积的生理盐水,持续1周,各组大鼠再进行Morris水迷宫测试。处死大鼠,取材,免疫组化观察大鼠海马凋亡调节因子Bcl-xl的表达,同时用原位末端标记法(TUNEL)检测海马神经元凋亡。结果:与C组相比,D组认知功能无明显改善,海马Bcl-xl表达水平和神经元凋亡无明显改变;与D组相比,E组大鼠学习和记忆成绩明显改善(P<0.05),海马Bcl-xl表达明显增高(P<0.05),海马神经元凋亡明显减少。结论:AngⅣ对糖尿病大鼠认知功能的改善作用可能与上调海马Bcl-xl的表达,减少糖尿病大鼠海马神经元凋亡有关。