益气活血复方抗动脉血栓形成及其作用机制研究

来源 :甘肃中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sdrtgwdrtwertwert
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目的:探求益气活血复方有效部位的高效提取、纯化方法,并借助大鼠颈动脉血栓模型观察益气活血复方有效部位对血栓形成的抑制及其作用机制。方法:1.以丹参中丹参酮ⅡA、丹酚酸B作为考察指标,使用乙醇回流提取,挥干药渣中乙醇,再次用水提取,分别得到丹参中脂溶性成分与水溶性成分。以西洋参中人参皂苷Rg1、Rb1、Re总量作为考察指标,使用乙醇回流提取,得到西洋参脂溶性成分。采用大孔吸附树脂分离手段,分别进行有效部位的纯化,分别得到丹参和西洋参有效部位。将所得丹参、西洋参有效部位按生药量3:1混合均匀,制成益气活血复方。2.选择SD雄性大鼠50只,随机分为假手术组(S)、模型组(M)、阿司匹林组(A)、益气活血复方高(H)、低(L)剂量组。预防给药7天后,假手术组以生理盐水、其他组别以FeCl3外敷颈总动脉诱导血栓形成法进行造模,继续灌胃给药21天,用酶联免疫法(E-Lisa)分别测定球后静脉血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F(6-K-PGF)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、蛋白C(PC)、纤溶酶原(PLG)、内皮素-1(ET-1)含量,并在采血结束后取颈动脉血栓段血管,利用HE染色法进行病理切片分析。结果:1.应用水、乙醇回流提取和大孔树脂分离纯化等方法,优化丹参和西洋参提取、纯化工艺,制成益气活血复方。2.通过优化丹参、西洋参提取纯化方法,缩短了益气活血复方的制备周期,提高了复方制备的效率。3.应用FeCl3外敷颈总动脉诱导血栓形成法构建大鼠颈动脉血栓模型,通过肉眼观察M组有明显血栓形成。4.与S组比较,M组血小板聚集率、TXB2含量、TXB2/6-K-PGF比值、ET-1含量升高(P<0.05);6-K-PGF、PC、AT-Ⅲ、PLG含量降低(P<0.05),差异有统计学意义。5.与M组比较,H、L组6-K-PGF、PC、AT-Ⅲ、PLG含量升高(P<0.05),TXB2含量、TXB2/6-K-PGF比值显著降低(P<0.01);A组TXB2、PLG含量、TXB2/6-K-PGF比值显著降低(P<0.01),6-K-PGF含量显著升高(P<0.01),差异有统计学意义。6.与M组比较,H、L组ET-1含量虽有降低趋势,但没有体现统计学差异。7.病理切片显示经FeCl3外敷后的大鼠颈总动脉有血栓形成,阿司匹林、益气活血复方对血栓均有不同程度的减轻。结论:1.FeCl3外敷颈总动脉诱导血栓形成法,对制造大鼠颈动脉血栓模型成功率较高,结果直观,可以作为益气活血复方考察模型使用。2.由丹参、西洋参配伍组成的益气活血复方,对大鼠颈动脉血栓生成具有抑制作用,并可能对血栓的消除起到促进作用。其作用机制可能是通过降低血浆TXB2、升高6-K-PGF含量完成的;通过升高血浆PC、AT-Ⅲ含量,增强抗凝系统活性实现;与血浆PLG含量升高,增加纤溶系统活性有关。
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