兰茵凤榆化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠IL-4、IL-6及TGF-β表达的实验研究

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目的:本实验通过观察兰茵凤榆化浊解毒方对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)模型大鼠IL-4、IL-6及TGF-β表达的影响,探讨兰茵凤榆化浊解毒方对UC治疗的作用机制,旨在为临床进一步治疗本病提供实验基础。方法:将60只清洁级wistar大鼠(雄性)按随机数字表法分为6组,每组10只。分别为空白对照组(N组)、模型对照组(M组)、柳氮磺吡啶对照组(SASP组)、兰茵凤榆化浊解毒高剂量组(HD组)、兰茵凤榆化浊解毒中剂量组(MD组)及兰茵凤榆化浊解毒低剂量组(LD组)。除空白对照组外,其余五组大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(trini-trobenzenesul-fonic acid,TNBS)/乙醇联合造模法制备UC动物模型。造模后第4天,空白对照组正常喂养,模型对照组予生理盐水灌胃,其他各组给予对应药物灌胃,每日1次,连续用药2周。期间观察并记录大鼠的粪便、精神活动、被毛、体重等一般情况,测算并记录各组大鼠疾病活动指数(Disease activity index,DAI)评分。治疗结束后,将大鼠处死,断头取血,以检测大鼠血清IL-4、IL-6的表达情况;解剖取结肠组织,以观察结肠黏膜肉眼变化及镜下病理改变并检测TGF-β的表达,对所得结果进行统计学分析。结果:1一般情况N组大鼠大便正常、呈球状,活动敏捷,反应灵活,毛色润泽,主动觅食,体重逐渐增加。与N组相比较,大鼠在造模后第2天开始出现黏液便、稀便,甚至血便,大鼠倦怠懒动,反应迟钝,被毛色泽晦暗、脱毛,进食量减少,体重日渐减轻。用药治疗2周后,HD组、MD组、LD组、SASP组大鼠大便,精神活动,被毛,进食量及体重等一般情况均有所改善,且HD组、MD组大鼠排便逐渐成球形,黏液脓血便减少,反应较灵活,主动觅食,毛色润泽。2疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分HD组、MD组、LD组、SASP组大鼠DAI评分均低于M组,差异有统计学意义(P<0.05);HD组、MD组大鼠DAI评分均低于SASP组,差异有统计学意义(P<0.05);HD组大鼠DAI评分低于MD组,差异有统计学意义(P<0.05);LD组大鼠DAI评分与SASP组比较,无统计学差异(P>0.05)。3结肠黏膜观察N组大鼠结肠黏膜未见充血水肿,表面光滑,皱襞清晰完整,未见糜烂及溃疡,未见炎性细胞浸润。M组大鼠结肠黏膜弥漫性充血水肿,黏膜质脆、粗糙,多处糜烂、溃疡,大量炎性细胞浸润。HD组、MD组、LD组、SASP组较M组大鼠结肠黏膜均有改善;HD组、MD组改善更明显,黏膜无明显充血水肿,未见明显糜烂、溃疡,仅散在少量炎性细胞浸润;SASP组及LD组黏膜轻度充血水肿,黏膜表面不光滑,散见小浅的糜烂灶,黏膜及黏膜下层可见炎性细胞浸润。4IL-4、IL-6及TGF-β检测结果4.1各组大鼠血清IL-4检验结果M组与其余各组大鼠血清IL-4含量相比,差异有统计学差异(P<0.05);N组大鼠血清IL-4含量高于HD组、MD组、LD组、SASP组,差异均有统计学意义(P<0.05); HD组大鼠血清IL-4含量高于MD组、LD组、SASP组,差异均有统计学意义(P<0.05);MD组、LD组、SASP组之间大鼠血清IL-4含量比较,无统计学差异(P>0.05)。4.2各组大鼠血清IL-6检验结果N组、HD组、MD组、LD组、SASP组大鼠血清IL-6含量均低于M组,差异均有统计学意义(P<0.05);HD组、MD组大鼠血清IL-6含量低于LD组和SASP组,差异均有统计学意义(P<0.05);HD组、MD组大鼠血清IL-6含量与N组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。4.3各组大鼠结肠组织TGF-β检测结果N组大鼠结肠组织中TGF-β有少量阳性表达,均低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05);M组大鼠结肠组织中TGF-β的表达显著增加,与其他各组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);HD组与MD组之间大鼠结肠组织中TGF-β表达比较,无统计学差异(P>0.05);HD组与LD组、SASP组大鼠结肠组织TGF-β的表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);LD组、SASP组大鼠结肠组织TGF-β的表达相比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:1兰茵凤榆化浊解毒方能明显改善UC大鼠的大便性状、精神活动、被毛及体重等一般情况,且方药剂量越大,疗效越好,表明药物用量与症状改善呈一定的量-效关系。2兰茵凤榆化浊解毒方能有效增加抗炎性细胞因子IL-4的含量,降低血清中促炎性细胞因子IL-6含量,降低结肠组织中TGF-β的表达,进而减轻炎症,这可能是该方治疗溃疡性结肠炎的重要机制之一。实验证明兰茵凤榆化浊解毒方对UC大鼠模型有很好的治疗作用。
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