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目的:本文优选了守宫多糖的提取、分离及纯化工艺,并对其抗肿瘤及促淋巴细胞增殖活性进行了跟踪。研究了纯化后的守宫多糖的部分物理化学性质,分子量,单糖组成,为守宫多糖的工业化生产及临床应用提供了实验依据。方法:1.以守宫多糖的含量和抗肿瘤及促淋巴细胞增殖活性为指标考察了水提法、超声法、酶解-水提法、酶解-超声法对守宫多糖提取率的影响,优选出最佳的提取方法。通过正交试验考察提取温度,料液比,提取次数以及提取时间对守宫多糖含量的影响,优选最佳提取工艺。2.以守宫多糖损失率,脱蛋白率及抗肿瘤活性为指标,考察Sevage法、三氯乙酸法(TCA)、酶+Sevage法、酶+TCA法、Sevage+TCA法对守宫多糖脱蛋白的影响。通过DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析和Sephadex-150凝胶柱层析进行分离纯化。得到守宫精制多糖。3.通过观察分离纯化后的守宫精制多糖与α-萘酚、双缩脲试剂、碘化钾-碘作用现象并判断守宫多糖的理化性质,通过硫酸钡比浊法测定守宫多糖的硫酸基含量。并通过红外光谱(IR),凝胶渗透色谱,纸色谱和气相色谱(GC)对所得守宫精制多糖进行了性质、分子量和组成分析的研究。结果:1.水提取守宫多糖对人肝癌细胞株HepG2、人乳腺癌细胞株SKBR3均有增殖抑制作用,对人外周脾淋巴细胞有增殖促进的作用。水提取守宫多糖的最佳提取条件为:在煮沸的条件下,料液比为1:15,共提取3次,每次lh。在该提取条件下守宫多糖含量为4.049%。2.守宫多糖的最佳脱蛋白法为木瓜蛋白酶+TCA法,在此方法下蛋白质去除率为70.46%,多糖损失率为25.17%,多糖含量14.27%,对人肝癌细胞株HepG2的抑制率为49.06%。DEAE-Sepharose Fast Flow(Cl-)弱极性阴离子交换柱层析法和SephadexG-150凝胶柱层析法分离均得到一个组分,该组分对人肝癌细胞株HepG2的抑制率为74.13%,多糖纯度为69.73%。3.实验所得守宫精制多糖为均一组分,淡黄色粉末,初步认为是一种糖蛋白,极易溶于水,pH6-7,不溶于丙酮、乙醇等试剂,其多糖含量为69.73%,蛋白质含量为18.83%,分子量为73956Da。红外光谱显示出多糖的特征峰。GC测定其单糖组成为甘露糖、半乳糖和葡萄糖。摩尔比为2:2:3。结论:在本实验研究中,采用不同的方法对守宫多糖进行提取,以多糖的含量以及抗肿瘤活性为指标,进行提取工艺的初探。经过筛选,选定水提法作为守宫多糖的提取方法。并对该方法提取守宫多糖,考察了提取温度、料液比、提取时间、提取次数对守宫多糖含量的影响。本实验选取的脱蛋白方法为木瓜蛋白酶+TCA法,在此方法下脱蛋白后的守宫多糖含量高,损失少,并且对肝癌细胞HepG2的抑制率高达74.13%。脱蛋白后的守宫多糖经DEAE阴离子交换柱和Sephadex-G150凝胶柱纯化后为单一峰,多糖纯度高达69.73%,并且有较好的抗肿瘤活性,为其临床应用提供了一定的依据。