研究目的RhD--缺失型是Rh血型系统一种极为罕见的变异体,血清学特征表现为红细胞上RhC/c、E/e抗原的完全缺乏和（或）D抗原的过量表达。目前RhD--缺失型的分子生物学机制尚不明确,国外的研究发现了两种情况:一种是RHCE基因完整但无表达活性,另一种是RHCE基因部分缺失。前者考虑是由于mRNA的转录活性降低所致,后者考虑是外显子部分缺失和基因重组两种机制。国内还没有相关报道。RhD--缺失型个体极易由输血或妊娠免疫,产生高效价的抗C/c、E/e的联合抗体（即抗Hro抗体）,这种抗体除了不与RhD--、Rhnull、Rhmod细胞反应外,与一般红细胞都发生强烈的凝集反应。该抗体可以通过胎盘进入胎儿体内致敏胎儿红细胞,引起严重的胎儿或新生儿溶血病。本研究发现了两例RhD--缺失型个体,均为女性,都发生了严重的胎儿新生儿溶血病。本研究通过对两例RhD--缺失型胎儿新生儿溶血病的临床特征和治疗措施进行系统研究,探讨母体意外抗体效价动态监测和宫内B超的临床意义以及采用最小不相容血液对RhD--缺失型HDN换血治疗的临床应用价值。由于同一种血型表型,可以对应多种基因型,而且在不同种族和同一种族的不同群体中,同一种表型所对应的基因型也不尽相同。目前有关血型基因结构的资料,大多数来源于白人,不符合我国的种族群体特点。中国人群民族多,数量大,遗传杂合性大。本研究通过对两例确证为RhD--缺失型个体的血清学特征、基因结构和表达的深入研究,明确中国部分汉族人群的RhD--缺失型个体可能存在的新的发生机制。这对搞清中华民族的血型基因结构,广泛开展血型基因分型技术是十分必要的,还可能发现新的RH等位基因。研究方法（1）采用经典的血细胞凝集法,对两位RhD--缺失型个体进行ABO和Rh血型鉴定、RhD--缺失型确认试验、直接和间接抗人球蛋白试验、意外抗体筛选与鉴定试验、母体意外抗体效价动态监测、胎儿和新生儿溶血病全套检测等,并对两个家系所有成员进行ABO和Rh血型调查。（2）对一例发生RhD--缺失型母儿血型不合HDN的新生儿进行常规内科治疗,监测溶血指标变化。在无法找到相合血源的情况下,采用最小不相容的血液为该新生儿换血。对另一例RhD--缺失型母儿血型不合HDFN,通过开展自体血储备、孕期监测、孕母服用中药治疗、孕母淋巴血浆置换、胎儿宫内输血、产后新生儿换血等综合救治方案进行干预和治疗。（3）采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）的方法,对两例RhD--缺失型个体以及家系成员RHD与RHCE基因多个外显子与内含子进行Rh血型基因定型;对两例RhD--缺失型个体采用HindⅢ和SphⅠ内切酶酶切血液基因组DNA并与特异性探针进行Southern blot,并采用PCR-SSP方法扩增两个体RHCE基因多个外显子和内含子,采用RT-PCR方法检测两例RhD--缺失型个体是否有RHCE剪接体转录。研究结果（1）两个体红细胞上RhC/c、E/e抗原完全缺乏,血清中均存在抗Hro抗体。两个体分别来自近亲和非近亲婚配的家系,亲代成员Rh表型均为纯合子,亲代成员中没有再次发现RhD--缺失型个体。（2）例1 RhD--缺失型个体的新生儿严重溶血,内科治疗无效,用最小不相容换血法为新生儿换血获得成功,及时挽救了患儿生命,经4年随访,患儿生长发育良好。例2 RhD--缺失型个体孕中期监测发现抗Hro抗体效价增高,经孕期综合治疗改善了胎儿宫内的贫血状况,有效延长了孕期。于孕32⁺²周剖宫产下一女婴,虽经换血等积极治疗,患儿始终无自主呼吸,并存在肠道畸形,家属放弃治疗。（3）Southernblot发现两例RhD--缺失型个体RHCE基因均存在exon1,但存在中间段缺失（exon4-7缺失）,进一步采用PCR-SSP方法特异性扩增RHCE基因多个外显子及内含子,证实RhD--缺失型个体RHCE intro4、exon4-7基因片段丢失,但exon3、exon9及3′端基因序列均存在。研究结论（1）两个体均为RhD--缺失型血型,RhD--缺失型既可发生于近亲家系,也可发生于非近亲家系。（2）RhD--缺失型个体妊娠极易发生严重的HDFN,最小不相容换血法是治疗RhD--缺失型HDN的一种有效的手段。加强孕期监测及孕期综合治疗是预防和控制由RhD--缺失型导致的HDFN的重要手段。（3）中国部分汉族人群的RhD--缺失型个体的产生原因是RHCE基因exon4-7缺失,其截短的RHCE基因不表达相关活性产物,这与国外学者对白人、黑人RhD--缺失型个体发生的分子机制研究结果不同。