目的：CD4+CD25+调节性T细胞在抗肿瘤免疫中起着重要的作用，它们在肿瘤患者中的作用机制尚未阐明。本研究通过检测原发性肝癌患者外周血和肿瘤组织中CD4+ CD25+调节性T细胞水平，评价CD4+ CD25+调节性T细胞在原发性肝细胞癌患者中的抗肿瘤免疫作用，从而为进一步寻求新的免疫治疗提供思路。　　 方法：收集2008年4月～12月在我院治疗的原发性肝细胞癌患者20例，男17例，女3例，均有慢性HBV感染史；慢性乙型肝炎（CHB）患者20例，男14例，女6例。原发性肝细胞癌经肝组织病理证实，CHB患者均符合2000年（西安）全国传染病与寄生虫病学会制定的病毒性肝炎诊断标准，6个月内均未应用抗病毒及免疫调节治疗，原发性肝细胞癌患者未进行肝动脉灌注化疗栓塞等其它治疗，选择同期在我院体检的正常对照19例，男11例，女8例。对照组肝组织来自肝血管瘤切除患者。所有研究对象均无自身免疫性疾病史。　　 应用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平：放免法测定血清甲胎蛋白（AFP）水平，酶免疫法检测HBV血清学标志。　　 取外周肝素抗凝血，应用CD4、CD25免疫荧光抗体染色，红细胞裂解液溶解红细胞，完全溶血后加0.02M磷酸盐缓冲液洗涤，应用加多聚甲醛-磷酸盐缓冲液固定，重新悬浮细胞，上流式细胞仪检测，淋巴细胞设门，分析CD4+T细胞中CD4+ CD25+T细胞的百分比。　　 HE染色观察肝组织普通病理变化。采用Power VisionTM二步法对肝组织进行Foxp3免疫组织化学染色，棕黄色着色为阳性表达，每例肝组织选取阳性表达较多的5个高倍视野（×400）计数阳性细胞，取平均值。　　 应用SPSS11.5统计软件对实验数据进行分析，组间比较采用Kruskal-Wallis H检验或Mann-Whitney U检验，相关性分析采用Spearman秩相关检验。　　 结果：　　 1.原发性肝细胞癌患者平均年龄大于正常对照组及CHB患者。肝癌患者血清AFP水平明显高于正常范围。　　 2.外周血CD4+ CD25+T细胞水平：原发性肝癌组CD4+CD25+T细胞百分比明显高于CHB组（U=123.0，P<0.05）及正常对照组（U=17.0，P<0.01），CHB组CD4+CD25+T细胞百分比高于正常对照组（U=37.0，P<0.01）。　　 3.肝组织Foxp3的表达：肝组织免疫组化染色可见Foxp3在T淋巴细胞核内特异性表达，原发性肝细胞癌患者阳性细胞散在分布于癌组织，CHB患者阳性细胞主要集中在炎症明显的汇管区，小叶内部分炎症坏死灶中偶见Foxp3阳性细胞，正常肝组织汇管区及肝小叶中未见Foxp3阳性细胞。癌组织、癌旁组织、CHB患者及正常对照组肝组织平均每高倍视野Foxp3阳性细胞比较有统计学差异，癌组织阳性细胞数高于癌旁组织（U=18.5，P<0.01）及CHB患者肝组织（U=123.5，P<0.05），癌旁组织与CHB患者肝组织比较，阳性细胞数无明显差异，U=75.0，P>0.05；癌组织、癌旁组织、CHB患者肝组织阳性细胞数均高于正常对照组。　　 4.相关性检验：原发性肝癌患者外周血CD4+ CD25+T细胞百分比与ALT无相关性，rs=0.155，P>0.05；与AFP也无相关性，rs=-0.118，P>0.05。　　 结论：　　 1.HCC患者发病年龄多在60岁左右，血清AFP水平明显高于正常范围。　　 2.正常对照人群、CHB患者、HCC患者外周血CD4+CD25+T细胞百分比依次升高，提示CD4+ CD25+T细胞在HCC的发病中起重要作用。　　 3.Foxp3阳性细胞散在分布于癌组织，CHB患者阳性细胞主要集中在炎症明显的汇管区，小叶内部分炎症坏死灶中偶见Foxp3阳性细胞，肝癌组织中阳性细胞数量明显高于CHB患者肝组织及癌旁组织，提示Tregs在肝癌组织局部免疫中发挥了重要作用。