绵羊毛性状相关基因的鉴定及初步研究

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中国美利奴羊无论在产毛量或羊毛品质上都是我国优秀的遗传资源,但它与澳洲美利奴羊等世界著名绵羊品种之间还存在着一定差距,如何缩小这种差距甚至超越它们成为我国绵羊遗传育种工作者的一项重要任务,而目前常规的育种方法已不能取得明显的改良效果,越来越多的育种工作者们试图通过寻找与绵羊毛性状相关的基因并运用分子水平的操作提高羊毛的产量和改善羊毛的品质。本研究首先以中国美利奴羊成年母羊为研究对象,利用mRNA差异显示技术对羊毛性状存在显著差异的绵羊不同部位(肩、腹、腿)皮肤中总RNA进行分析,寻找皮肤中差异表达的基因,经过筛选,本研究共获得差异表达的基因片段4个,其中,差异表达基因SeqI,seqII,seqⅢ为绵羊肩、腹部特异表达的基因,3个基因片段的大小分别为190bp,222bp,175bp,差异表达基因IV为腿部特异表达的基因,片段大小为255bp。对4个特异基因片段进行克隆、测序,并进行初步的生物信息学分析,在NCBI数据库中利用blastn进行检索,未发现与4个基因片段高度同源的序列。通过Northern Blot鉴定后,利用组织原位杂交技术对4个片段在绵羊毛囊的表达情况进行了检测.检测结果显示在绵羊毛囊中存在4个基因的mRNA,表明4个DNA在绵羊毛囊中转录形成相应的mRNA,4个基因的全序列和具体功能还需进行深入研究。同时,本研究还利用组织原位杂交技术对生长激素受体(GHR)基因在绵羊毛囊的表达进行了检测,GHR为生长激素(GH)的受体,GH作用有两种方式:一是先作用于肝脏等器官的GHR,产生胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors,IGFs),IGFs以内分泌方式进入血液,与结合蛋白(IGFBPs)结合后到达细胞,作用于细胞膜表面的IGF受体(IGFR),调节动物生长发育;二是GH直接作用于靶器官的GHR,通过旁分泌或自分泌IGFs直接影响细胞的代谢而调节器官的生长发育。本研究的检测结果表明在绵羊毛囊存在GHR基因的表达,因此GH对羊毛生长的影响是通过与绵羊毛囊中细胞表面的GHR结合,通过旁分泌或自分泌IGFs而实现的。
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