喜树碱(CPT)是一种从中国特有的珙桐科植物喜树(Camptotheca acuminata)中提取出来的一种天然生物碱,具有强大的抗肿瘤活性。但由于其化学结构不稳定性,水溶性差,血浆蛋白结合率低,口服生物利用度较差且多变,导致了不可预测的毒性。E2和G2是课题组合成的两个新型胆酸偶联喜树碱衍生物,在体内外均表现出了较佳的抗肿瘤活性,且其细胞毒性小于喜树碱,并且对肝细胞具有良好的靶向性作用。目的:通过研究胆酸偶联喜树碱衍生物E2、G2在大鼠肝微粒体中的转化情况以及它们在大鼠血浆、人工胃液、人工肠液中的稳定性预测其在生物体内的代谢特性。方法:首先建立并优化了用于E2、G2定量检测的高效液相(HPLC)方法。以此为分析手段考察了E2、G2在大鼠血浆、人工胃液、人工肠液中的稳定性。其后使用大鼠肝微粒体体外模型对E2、G2的代谢特性进行考察,包括代谢稳定性、酶动力学、代谢酶亚型的确定以及代谢产物的初步推测。结果:(1)生物稳定性实验结果表明通过偶联胆酸得到的喜树碱衍生物E2、G2在大鼠血浆以及人工胃肠液中均具有高于喜树碱的稳定性,同时内酯环稳定性也显著增强,证明偶联胆酸能够有效地提高喜树碱结构以及活性的稳定;(2)大鼠肝微粒体代谢结果表明E2、G2在含NADPH的Ⅰ相代谢体系中具有最显著的消除率,表明由NADPH诱导的Ⅰ相氧化反应可能是E2、G2的代谢主要途径,且与G2相比,E2的消除速率更快,但底物消除百分比略低于G2;(3)化学抑制结果表明CYP2D6、CYP21A2可能是E2主要作用酶亚型,CYP2B6参与一小部分;CYP2C8、CYP3A4、CYP2B6、CYP1A2均可能是G2相关作用酶亚型,其中CYP2C8、CYP3A4更为主要。两者代谢相关酶亚型存在明显差异。酶促反应动力学结果显示虽然E2和G2具有相似的最大反应速率,但E2的K_m值约为G2的三倍,G2的固有清除率约为E2的三倍,表明G2与CYP酶之间具有更高的亲和力,更易被代谢转化,而E2具有更高的代谢稳定性;(4)最终鉴定得到10个E2代谢产物,14个G2代谢产物。两者代谢途径高度一致,主要通过水解作用以及小比例的羟基化作用得到Ⅰ相代谢物并发生后续葡糖苷酸化得Ⅱ相代谢物进而消除,但可能由于代谢稳定性不同存在微小差异。结论:综上所述,相对于喜树碱,通过偶联胆酸得到的衍生物E2和G2在生物环境下能够明显提高其生物稳定性及活性。两者分别通过酯键和酰胺键与胆酸连接,具有高度相似的代谢途径,但由于其结构差异在一定程度上也影响了其代谢酶亚型,代谢稳定性以及生成的代谢物等代谢特性有所差异。但总体而言两者在大鼠肝微粒体作用下的固有清除率均较低,具有较强的代谢稳定性。故猜测两者可能能够绝大部分以原形在体内发挥作用,实现其肝靶向性,具有一定的研究价值。其中通过酰胺键连接得到的化合物E2在大鼠血浆,人工胃肠液与大鼠肝微粒体中均表现出了优于G2的稳定性,表明酰胺键作为连接键对于维持物质体内稳定性更具优势。