针康法对局灶性脑缺血大鼠前肢运动功能的影响及相关机制的研究

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目的观察头穴丛刺结合任务导向性康复训练(针康法)对局灶性脑缺血大鼠前肢运动功能及缺血区皮层GAP-43、SYN、GFAP、Vim、 S100β表达的影响,探讨该方法促进脑缺血大鼠神经功能恢复及可能机制。方法1.随机将96只大鼠分为4组,即假手术组、模型组、任务导向性训练组、跑台训练组。每组再按3、7、14、21天分为4亚组,每组6只。采用内皮素-1注射法制备局灶性脑缺血大鼠前肢损伤模型。假手术组、模型组不进行任何干预,任务导向性训练组给予前肢抓取训练,跑台训练组给予跑台训练;各时间点采用网屏试验观察各组大鼠前肢运动功能,采用免疫组化法检测各组大鼠缺血区GAP-43、SYN表达的变化。2.随机将120只大鼠分为5组,即假手术组、模型组、任务导向性训练组、头穴丛刺组、头穴丛刺结合任务导向性康复训练(针康)组。每组再按3、7、14、21天分为4亚组,每组6只。采用内皮素-1注射法制备局灶性脑缺血大鼠前肢损伤模型。假手术组模型组不进行任何干预,任务导向性训练组采用前肢抓取训练;头穴丛刺组采用头穴丛刺治疗;穴丛刺结合任务导向性康复训练组采用针康法治疗,即在头穴丛刺留针期间进行前肢抓取训练。各时间点通过前肢抓取试验观察各组大鼠的前肢运动功能,免疫组化法检测各组大鼠缺血区皮层GAP-43、SYN、GFAP、Vim、S100β表达的变化结果1.网屏试验评分:与假手术组比较,各时间点,模型组大鼠网评试验评分增高,差异显著(P<0.05);与模型组比较,任务导向组从造模后14d开始有显著差异(P<0.05),跑台组于造模后21d有显著差异(P<0.05);与跑台组相比,造模后14d和21d时,任务导向组大鼠网评试验评分降低,差异有统计学意义(P<0.05)。。2.前肢抓取成功率:各时间点,与假手术组前比较,各组抓取成功率均有降低(P<0.01)。与模型组相比,从造模后3d开始,针康组前肢抓取率提高,差异有统计学意义(p<0.05);造模后14d、21d,与康复组、针刺组相比,针康组前肢抓取率明显提高(P<0.05)。3.缺血区皮层SYN的表达:与假手术组相比,造模后3d,模型组缺血区周围突触素光密度值降低,差异显著(P<0.05);造模后14d、21d,与跑台组相比,任务导向组光密度值增加明显(P<0.05),针康组与康复组、针刺组的相比,SYN的表达差异有统计学意义(p<0.05)。4.缺血区皮层GAP-43的表达:与假手术组相比,造模后3d,模型组缺血区GAP-43阳性细胞数增加,差异显著(P<0.05);造模后14d、21d,任务导向组与跑台组相比差异有统计学意义(P<0.05),针康组与康复组、针刺组的相比,GAP-43表达差异有统计学意义(p<0.05)。5.缺血区皮层GFAP的表达:造模后7d、14d,与模型组相比针康组、康复组、针刺组均有统计学意义(p<0.05),针康组优于康复组、针刺组(p<0.05);针康组与康复组、针刺组组间均有统计学意义(p<0.05)。造模后21d,针康组GFAP阳性细胞表达优于其它各组(p<0.05)6.缺血区皮层S100β的表达:造模后3d、7d,各组与假手术比较均有统计学意义(p<0.05)。造模后3d,与模型组相比,康复组、针康组S100β阳性细胞表达增加,差异有统计学意义(p<0.05);造模后14d,针康组与模型组比较差异均有统计学意义(p<0.01)。造模后21d,针康组与针刺组、康复组、模型组组间差异均有统计学意义(p<0.05)7.缺血区皮层Vim的表达:造模后3d、7d、14d,模型组与假手术组比较差异均有统计学意义(p<0.05);与模型组相比,造模后3d、7d,针康组、康复组、针刺组VIM阳性细胞表达增加,差异有统计学意义(p<0.05);造模7d后,针康组的VIM阳性表达有所降低,与其他组比较,仍有统计学意义(p<0.05)结论1.任务导向性训练能够提高局灶性脑缺血大鼠前肢运动功能,优于跑台训练2.任务导向性训练能够促进局灶性脑缺血大鼠皮质缺血区周围GAP-43和SYN的表达,优于跑台训练。3.针康法能够提高局灶性脑缺血大鼠的前肢运动功能,优于单纯任务导向性训练和头穴丛刺4.针康法能够促进局灶性脑缺血大鼠皮质缺血区周围GAP-43和SYN的表达,从而促进神经发芽新突触形成,5.针康法能够促进局灶性脑缺血大鼠皮质缺血区周围GFAP、 S100β、VIM的表达,促进胶质细胞活化,从而减轻神经元的损伤优于单纯任务导向性训练和头穴丛刺。
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