人参是名贵的传统中药，含有多种药物活性成分，人参皂甙是其中的主要活性成分之一。到目前为止，已经从人参中分离并鉴定出四十余种人参皂甙，有些人参皂甙如Rg3、Rh2、C-K等具有重要的生物活性和药理活性。由于这些人参皂甙含量低，但是活性好，所以制备这些人参皂甙成为近年来药物学研究的热点。这些稀有人参皂甙从人参中直接提取很难，有些稀有人参皂甙的化学结构与人参中含量较高的人参皂甙如Rbl的化学结构相似，只是少了若干个糖残基，可以通过转化高含量人参皂甙中的糖基来获得稀有人参皂甙。转化人参皂甙糖基的方法通常有化学法和生物转化法，其中生物转化法具有选择性高、副产物少、环境污染小等优点，已成为制备稀有人参皂甙最具有潜力的方法。本论文的主要研究内容及结果为：
　　 1.优化人参锈腐菌的培养及发酵条件
　　 通过培养基和接种量的选择、测定最适发酵时间、人参皂甙诱导实验、孢子再利用实验等优化人参锈腐菌的培养及发酵条件，结果表明在V8汁液体培养基中以瓶/10板菌的接种量振荡培养84h时酶活性最高。人参皂甙诱导、孢子再利用两种方法均没有提高酶活性。
　　 2.分离水解人参皂甙Rbl的糖苷酶
　　 利用优化的培养发酵条件培养人参锈腐菌，提取粗酶，探索分离方法。经过分离方法的探索，摸索出一套比较理想的分离制备路线，最终采用如下的分离制备方法：培养84h的人参锈腐菌发酵液过滤、离心，将上清液（粗酶液）依次经过DEAE-纤维素阴离子交换层析、30％-80％(NH4)2S04盐析、Sepharose CL-6B凝胶过滤层析、DEAE-Sepharose fast flow浓缩、Mono Q HR5/5阴离子交换层析(HPLC)步骤的分离后得到部分纯化的酶，部分纯化的酶与粗酶液相比，纯化了313倍，产率为12％。
　　 3.确定人参皂甙Rbl水解酶的性质
　　 部分纯化后的酶的性质研究表明：酶的最适pH为5.0，酶在pH3.0-11.0的范围内稳定性较好；酶的最适温度为55℃，在20-55℃范围内酶的稳定性较好。Mg2+对酶活性有一定的激活作用：Na+、K+、Ca+、EDTA、Cu2+、Zn2+对酶活性均具有不同程度的抑制作用，其中Cu2+对酶活性有较强的抑制作用。酶的底物专一性测定结果表明此酶能特异性水解β-D-葡萄糖苷键，说明它是一种β-葡萄糖苷酶。该酶可转化高含量人参皂甙Rbl，终产物为较高活性人参皂甙C-K，根据TLC结果推测转化率约为70％。转化路径为：Rbl→Rd→F2→C-K。
　　 综上所述，本论文优化人参锈腐菌的培养及发酵条件，分离制备出部分纯化的能转化人参皂甙Rbl到C-K的糖苷水解酶，并确定了酶学性质。部分纯化后的酶，活性大幅度提高，具有工业应用制备C-K的潜力。