目的:　　1.马兜铃酸Ⅰ(Aristolochic acidⅠ，AAⅠ)是主要的肾毒素和致癌物，和马兜铃酸肾病或巴尔干地区性肾病及伴随的上尿路肿瘤密切相关。中国，特别是沿海地区，是上尿路上皮肿瘤的高发地区，并且服用含马兜铃酸成分的中草药可促进该尿路上皮的癌变。E-钙黏蛋白(E-cadherin)在细胞的粘附过程中起关键作用，其缺失性表达将导致上皮细胞的恶性转化。血管内皮生长因子(VEGF)被认为是各种癌变细胞血管生长的关键调节器。此外，基质金属蛋白酶(MMPs)在保护细胞微环境起着关键作用，MMP9被认为是肿瘤侵袭、恶性转化、血管生成的关键因素。然而AAⅠ诱导癌变机制目前还未阐明，因此本次实验的目的是探究AAⅠ诱导的可能癌变机制。分析AAⅠ能否诱导人永生化尿路上皮细胞(SV-HUC-1)MMP9、VEGF、E-cadherin的表达。　　2.比较马兜铃酸相关上尿路肿瘤(upper urothelial carcinomas associated withAAN，AA-UUC)和非AA相关(non-AA-UUC)的肿瘤病人MMP9、VEGF、E-cadherin的表达变化。　　方法:　　1.SV-HUC-1细胞暴露于AAⅠ(2.5、5、10、20、40、80μg/ml)24 h、48 h、72 h，用MTT法测出细胞的增殖活力，相差显微镜观察各浓度细胞的生长情况。　　2.SV-HUC-1细胞暴露于低浓度的AAⅠ(2.5、5、10μg/ml)48h，用细胞组化、WB蛋白印迹和实时荧光定量PCR分析MMP9、VEGF、E-cadherin的表达。用10μM的ERK1/2抑制剂(U0126)预先作用细胞作用1h，观察MMP9、VEGF、E-cadherin的表达变化。　　3.WB蛋白印迹比较AA-UUC和non-AA-UUC的MMP9、VEGF、E-cadherin、PERK的表达。　　结果:　　1.MTT细胞活力检测表明不同浓度的AAⅠ作用于SV-HUC-1细胞24 h，与对照组(DMSO)相比，各浓度AAⅠ的A570值（波长为570 nm处测定吸光度值）差别无统计学意义(p＞0.05)，表明AAⅠ对SV-HUC-1细胞增值无明显作用。当作用时间增加至48 h及72 h时，随着浓度的增加，各浓度AAⅠ的A570值和对照组相比有统计学意义（p＜0.05），表明随着AAⅠ浓度增加，对细胞增殖抑制作用也增加。相差显微镜观察到溶剂对照组的SV-HUC-1细胞能保持正常细胞形态和细胞间隙。当细胞暴露于2.5μg/ml of AAⅠ48 h后，细胞仍能保持正常的大小和形态。当细胞暴露于5.0μg/ml的AAⅠ48h后，AAⅠ对细胞的毒性作用表现为细胞失去增值能力，部分细胞失去典型的形态。增加浓度到10.0μg/ml，SV-HUC-1细胞开始变圆，表现出核固缩。继续增加AAⅠ浓度至20.0μg/ml，SV-HUC-1细胞的细胞质开始出现空泡化。当细胞暴露于40.0μg/ml的AAⅠ48 h后，部分细胞的胞浆发生空泡化，细胞核固缩。　　2.随着AAⅠ浓度的增加，MMP9、VEGF的mRNA和蛋白的表达逐渐增加，而E-cadherin的相应表达却下降。然而，当SV-HUC-1细胞预先用ERK1/2信号通路抑制剂（10μM的U0126）作用1h，MMP9、VEGF蛋白的表达被抑制，而E-cadherin蛋白的表达恢复。　　3.和non-AA-UUC相比，AA-UUC的MMP9、VEGF、PERK1/2的蛋白表达增加，而E-cadherin蛋白表达下降。　　结论:　　1.低浓度的AAⅠ可能通过激活SV-HUC-1细胞的ERK1/2信号通路使MMP9、VEGF、E-cadherin表达失调，高浓度的AAⅠ对细胞的生长起明显抑制作用。　　2.马兜铃酸(AA)可能是上尿路肿瘤发生的原因之一。