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目的：构建转SPHvt/GNA融合毒力蛋白基因的球孢白僵菌菌株，使得该转基因菌株对蚊虫的毒力增强，从而为控制蚊虫及蚊媒传染病提供新的思路。 方法: 1.将已知的澳大利亚漏斗网蜘蛛（Hadronyche versuta）产生的一种毒素ω-hexatoxin-Hv1a（SPHvt）和雪莲花凝集素（Galanthus nivalis agglutinin，GNA）的氨基酸序列，根据Cordyceps bassiana的密码子偏好性进行优化，获得融合SPHvt/GNA基因序列，并在生物公司合成该融合基因。 2.运用分子克隆技术，通过设计酶切位点，酶切，载体与目的基因的连接等方法，以质粒载体pBarGPE1、pBarGFP为基础质粒，构建由gpdA启动子驱动的flag为检测标记，绿色荧光蛋白作为筛选标志物的重组质粒载体pBarGFPSPHvt/GNA。 3.运用根癌农杆菌介导的真菌遗传转化的方法将重组载体质粒pBarGFPSPHvt/GNA导入球孢白僵菌Bb252的基因组上，获得转SPHvt/GNA融合毒力蛋白基因的球孢白僵菌菌株。 4.对获得的转基因菌株进行荧光筛选，并在基因组水平，转录水平，蛋白水平进行验证。 5.测定转基因菌株Bb252::pBarGFPSPHvt/GNA对斯氏按蚊幼虫的毒力并观察其侵染斯氏按蚊幼虫的过程。 结果：成功构建了由gpdA启动子驱动、flag为检测标记、绿色荧光蛋白作为筛选标志物的重组载体质粒pBarGFPSPHvt/GNA，并筛选到发绿色荧光的转基因菌株，且经基因组水平，转录水平，蛋白水平验证表明成功获得转SPHvt/GNA融合毒力蛋白基因的球孢白僵菌菌株。对斯氏按蚊幼虫的毒力测定中，该转毒力蛋白基因菌株明显比野生型菌株Bb252的毒力强。 结论：我们成功构建了由gpdA启动子驱动、flag为检测标记、绿色荧光蛋白作为筛选标志物的重组载体质粒pBarGFPSPHvt/GNA，并获得了转SPHvt/GNA融合毒力蛋白基因的球孢白僵菌菌株，且该转基因菌株对斯氏按蚊幼虫的毒力明显增强,为控制蚊虫及蚊媒传染病提供新的思路。