离心式CD微流控芯片体系电致化学发光免疫分析的基础研究

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生命科学的发展对生化分析提出了更高的要求。高聚物离心式CD微流控芯片以其材料价格低廉、适于大批量生产、样品试剂消耗少、检测仪器微型化和自动化、高通量多重平行分析等特点,很大程度上满足了生化分析的需要,因此高聚物离心式CD芯片的研究和发展具有非常重要的意义。 本论文是在结合国家自然科学基金课题“离心式微流控芯片体系生化分析的研究”的要求下,以研究制作PMMA材质芯片为基础,对芯片体系上的化学发光免疫分析和电化学发光分析进行了实验探索和基础研究。论文共包括四章内容: 第一章分别综述了离心式CD芯片体系的研究现状、PMMA材质芯片的制作和化学发光免疫分析的研究进展。 第二章研究了PMMA材质芯片的制作工艺。介绍了一种制作高聚物微流控芯片的新方法,即电热压法。通过比较常用的塑料芯片制造方法一热压法、CNC雕刻法、热封合等,对各方法的实验参数进行了优化,分析总结了它们的优缺点,并用现有条件制作了离心式CD微流控芯片。 第三章研究了芯片上的HBsAg化学发光免疫分析。实验利用PMMA高聚物材料对免疫蛋白试剂有一定吸附能力,设计制作了用于化学发光免疫分析的微流控芯片体系,初步实现了以芯片为载体的化学发光免疫分析测定HBsAg的研究。实验过程具有消耗试剂少(约为通常的1/15),分析测试时间短(约为通常的1/8)等优点,检测结果与传统的ELISA法相当。 第四章研究了芯片上的鲁米诺体系电化学发光行为。研制了用于电化学发光分析的微流控芯片,在该PMMA材质芯片上集成制作了20μL的微电解池。以此为工作平台,对影响鲁米诺—氢氧化钾—氯化钾电化学发光体系的各种因素进行了考察分析。在对电学参数、溶液酸碱性等条件进行优化的基础上,考察了该系统的性能,结果令人满意。
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