加味楂曲饮干预非酒精性脂肪肝大鼠动物模型的实验研究

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目的通过加味楂曲饮对实验大鼠转氨酶、血脂、脂联素、肿瘤坏死因子-α、CYP2E1调节的研究,探讨加味楂曲饮干预NAFLD大鼠模型的药效学及作用机制。方法SPF级SD大鼠60只,随机分为6组:空白组、模型组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。空白组给予基础饲料,其余各组给予高脂饲料造模,自造模第1天起,阳性对照组给予灌服浓度为0.038g/ml复方蛋氨酸胆碱溶液,低、中、高剂量组分别灌服浓度为1g/ml、2g/ml、4g/ml的加味楂曲饮溶液,空白组、模型组大鼠灌服等体积生理盐水。各组大鼠每天灌药1次,每次用药体积以10mL/kg计算。8周后,采用常规油红O法(改良Lillie)观察肝脏组织形态学改变,全自动生化仪测定血清丙氨酸基转移酶(Alanine Transaminase, ALT)、谷氨酸基转移酶(AsPartate Amino Transferase, AST)、甘油三酯(Triglycerides, TG)、总胆固醇(Total Cholesterol, TC)水平,Elisa检测血清脂联素(AdiPonection, ADP)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alPha, TNF-α)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)水平。采用荧光定量PCR法检测肝组织中CYP2E1mRNA表达情况,用Western-blot法检测肝组织CYP2E1蛋白表达情况。结果造模8周后,与空白组相比,模型组大鼠肝脏光镜下可以看到中度以上的脂肪变,血清中ALT、AST、TC、TG、FFA、TNF-α含量均明显高于空白组(P<0.01),脂联素含量明显低于空白组(P<0.01),肝组织CYP2E1mRNA的表达明显高于空白组(P<0.01);与模型组相比,阳性对照组大鼠血清ALT、TC含量明显降低(P<0.01),血清中AST、TG中含量明显降低(P<0.05),中、高剂量组大鼠血清TC、TG、ALT、AST含量均明显降低(P<0.01),,低剂量组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG含量与模型组无明显差异(P>0.05),中剂量组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、FFA、TNF-α含量明显低于模型组(P<0.01),血清中ADP明显高于模型组(P<0.01),肝脏CYP2E1mRNA的表达量亦明显低于模型组(P<0.05),高剂量组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG含量明显低于模型组(P<0.01);与阳性对照组组相比,中剂量大鼠血清中ALT、AST、TC、TG含量明显低于阳性对照组(P<0.05),高剂量组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG含量明显低于阳性对照组(P<0.01),但中剂量组与高剂量组大鼠血清中ALT、AST、TC、TG含量无明显差异(P>0.05)。结论加味楂曲饮在降低NAFLD大鼠血中ALT、AST、FFA、TNF-α含量时能明显升高血中脂联素的含量,同时还可抑制大鼠肝组织中CYP2E1的表达,推测加味楂曲饮改善非酒精性脂肪肝的作用可能与改善IR状态、抗氧化有关。
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