【摘 要】
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藻胆蛋白是蓝藻体内捕光复合物的功能组分,对其生物合成的了解,将促进对光合作用形成和机理的认识.目前已对藻红蓝蛋白裂合异构酶PecE/PecF和藻蓝蛋白裂合酶CpcE/CpcF的功能
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藻胆蛋白是蓝藻体内捕光复合物的功能组分,对其生物合成的了解,将促进对光合作用形成和机理的认识.目前已对藻红蓝蛋白裂合异构酶PecE/PecF和藻蓝蛋白裂合酶CpcE/CpcF的功能进行了初步研究.体内和体外实验证实,PecE/PecF和CpcE/CpcF分别催化藻红蓝蛋白α亚基(α-PEC)和藻蓝蛋白α亚基(α-CPC)的生物合成.有关藻红蓝蛋白β亚基(β-PEC)和藻蓝蛋白β亚基(β-CPC)生物合成的研究还未见报道.该文以层理鞭枝藻(Mastigocladus laminosus)为材料,通过对藻胆蛋白体外重组反应的研究,初步了解藻胆蛋白的生物合成.为获得体外重组实验所需要的蛋白质,首先利用分子生物学方法得到了分别含有以下DNA片段的克隆质粒、表达质粒以及相应的蛋白质:pecA、pecA-N45、pecA-N65、cpcA、pecB、pecB、cpcB、cpcB、pecC、cpcC,并采用生物化学手段对这些蛋白质进行了纯化.同时,通过克隆、测序,得到了层理鞭枝藻(Mastigocladus laminosusPCC 7603)中cpcE和cpcF的序列,并对相应的氨基酸序列进行了同源性分析.该文对脱辅基藻胆蛋白与色素的体外重组研究分为两部分:(1)具有单色素结合位点的蛋白,α-PEC脱辅基蛋白(PecA)和α-CPC脱辅基蛋白(CpcA)与色素的体外重组;(2)具有双色素结合位点的蛋白,β-PEC脱辅基蛋白(PecB)和β-CPC脱辅基蛋白(CpcB)与色素的体外重组.
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