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第一部分人胶质瘤中survivin蛋白的表达及其与肿瘤增殖、凋亡、血管生成相关性研究【摘要】目的探讨survivin在胶质瘤中的表达规律及其与增殖指数、凋亡指数和微血管密度的相关性。方法采用免疫组织化学S-P法检测10正常脑组织和73例胶质瘤中survivin蛋白、Ki67和FⅧRAg的表达，肿瘤细胞的凋亡采用TUNEL检测，并结合病理特点进行分析。结果正常脑组织中未见survivin表达，胶质瘤中survivin表达阳性率为54.8％，Ⅰ-Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级survivin的表达率分别为25.9％、57.1％、84.0％，组织学分级之间差异显著(p＜0.05)。此外，survivin的表达阳性者其Ki67、微血管密度明显高于survivin阴性者，而其凋亡率则低于survivin阴性者，差异性显著(P＜0.05)。结论Survivin在胶质瘤中高表达，与其恶性程度、凋亡、增殖活性及血管生成密切相关，可望成为诊断治疗的新靶点。第二部分Survivin ASODN诱导U251细胞的凋亡及其作用机制【摘要】目的探讨脂质体介导的survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人胶质瘤细胞株U251凋亡的影响及其作用机制。方法针对survivin mRNA启动子区合成20mer反义寡核苷酸。脂质体介导不同浓度的ASODN转染U251细胞，倒置显微镜观察转染前后细胞形态学改变，流式细胞仪检测U251细胞的凋亡，比色法测定caspase-3的相对活性。结果Survivin ASODN转染U251细胞后，各实验组的凋亡率逐渐增加，呈剂量依赖性，以800nmol／L抑制率最高，达40.5％，较对照组和SODN组有显著差异性(P＜0.01)。尽管survivin ASODN对U251细胞caspase-3的表达水平无明显影响，但caspase-3的活性却随着survivin ASODN的浓度增加而升高。结论Survivin ASODN可促进U251细胞的凋亡，caspase-3的活化是导致U251细胞发生凋亡的关键因素。第三部分Survivin ASODN对U251survivin表达的影响及其对化疗药物的增敏作用【摘要】目的探讨survivin ASODN对U251细胞survivin mRNA、蛋白表达的影响及其对化疗药物DDP的增敏作用。方法采用RT-PCR和Western-blot检测survivin ASODN作用后U251细胞survivin mRNA、蛋白的表达；四唑盐比色法(MTT)法检测survivin ASODN对细胞增殖的影响。结果Survivin ASODN转染U251细胞后，100、200、400、800nmol／L肿瘤细胞抑制率分别为22.0％、41.5％、57.3％、62.7％，与对照组及SODN组相比有显著差异性(P＜0.01)。同时，其mRNA、蛋白的表达呈剂量依赖性下降。以200nmol／L联合顺铂作用于U251后，其生长抑制率为74.7％，显著高于单用survivin ASODN组的38.4％和单用顺铂处理组的33.6％。结论Survivin ASODN可抑制肿瘤细胞的增殖，有效地下调survivin mRNA和蛋白的表达，并能增加U251细胞对化疗药物的敏感性。