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化疗是临床治疗肿瘤的主要手段之一,但肿瘤化疗耐药问题非常突出,是致使化疗失败的重要原因。肿瘤的耐药机制相当复杂,其中肿瘤细胞DNA损伤修复能力是重要原因之一。hSMG-1(the human of suppressor of morphogenesis in genitalia-1)是人们最新研究发现的一个PIKK家族成员,在细胞DNA损伤修复中起着重要的作用,抑制hSMG-1基因不仅能够诱导肺癌A549细胞自发性凋亡,还能显著增强其放疗敏感性,但hSMG-1基因与肿瘤化疗敏感性是否相关尚不清楚。本文选取了一些人肺癌、宫颈癌、胰腺癌细胞株,研究了抗癌药、X射线照射作用下hSMG-1基因表达的变化；利用RNA干扰(RNAi)技术抑制hSMG-1基因的表达,对hSMG-1基因与肿瘤细胞化疗敏感性的关系进行了研究。主要研究内容如下：1、将人非小细胞肺癌细胞株A549和H1299、人宫颈癌细胞株HeLa、人胰腺癌细胞株PANC-1和人胚肺二倍体细胞株CCC-HPF-1分别培养至对数生长期后,提取细胞的总RNA, RT-PCR扩增p53和hSMG-1 cDNA,凝胶电泳结果显示,hSMG-1基因在这些细胞中均普遍表达。2、用吉西他滨(10mg·L-1、1.0mg·L-1、0.1mg·L-1、0.01mg·L-1,4h、48h)和X-ray (2Gy、4Gy、8Gy,4h)对人非小细胞肺癌细胞株A549和H1299、人宫颈癌细胞株HeLa和人胚肺二倍体细胞株CCC-HPF-1进行处理,实时定量RT-PCR扩增hSMG-1 cDNA,ΔΔCt法分析hSMG-1的相对表达量结果显示,两种作用方法均使CCC-HPF-1、A549和HeLa细胞内的hSMG-1表达量减少,而H1299细胞内的则呈增加趋势,表明两种治疗手段均能影响hSMG-1 mRNA的表达,且和细胞类型有关。3、研究RNAi抑制hSMG-1表达增强肺癌细胞化疗敏感性的情况。利用RNAi技术处理后,肺癌A549和H1299细胞内hSMG-1的表达抑制率分别达到53.2%和75.2%。给予0.1 mg·L-1 GEM和1.0 mg·L-1顺铂分别作用48h后,流式细胞术检测结果显示转染hSMG-1 siRNA组细胞的化疗敏感性均明显增加,其中A549细胞死亡率分别提高了3.4倍和11.7倍,H1299细胞分别增加了56.0%和85.9%。进一步研究发现,抑制hSMG-1基因后,给予抗癌药GEM和顺铂处理,H1299细胞内活化的caspase 3的表达量显著增加(86%和73%),表明抑制hSMG-1后,H1299细胞化疗敏感性增加和细胞的caspase蛋白凋亡途径相关。