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目的:1.在缺血再灌注损伤致大鼠子宫内膜变薄的实验研究基础上,对缺血性薄型子宫内膜大鼠模型进行整合验证,建立薄型子宫内膜大鼠模型,为临床治疗提供实验研究基础。2.以大鼠缺血性损伤模型为实验对象,在造模后给予2个动情周期中药灌胃,以血管生成途径为切入点,研究补肾中药复方对缺血性损伤薄型子宫内膜大鼠VEGF、Ang-2、MVD的影响,揭示补肾中药复方干预缺血性损伤大鼠薄型子宫内膜的部分机制,为临床治疗提供科学的理论依据。 方法:1.选用SD大鼠60只,筛选具有完整动情周期并处于动情后期的大鼠32只,并随机分为空白组、假手术组、双侧卵巢动脉夹闭0.5h组、双侧卵巢动脉夹闭1h组,假手术组只找到卵巢动脉,用丝线从血管下部穿过,不打结及阻断血流。观察子宫组织及卵巢组织术中变化,取材后HE染色观察子宫内膜结构及厚度改变情况,免疫组化技术检测子宫内膜组织中VEGF、Ang-2、MVD含量的变化情况。2.选用SD大鼠80只,筛选具有完整动情周期并处于动情后期的大鼠65只,并随机分为假手术组、模型组、中药治疗1组(低浓度组)、中药治疗2组(中浓度组)和中药治疗3组(高浓度组)。模型组与中药治疗组均使用微动脉夹阻断双侧卵巢动脉1h,假手术组只用丝线穿过双侧卵巢动脉,不结扎,常规关腹。术后常规抗炎处理3天。中药治疗1组、2组、3组分别于造模后第1d开始按大鼠等效剂量灌胃,其余组给予对应剂量的生理盐水灌胃,直至2个动情周期后取出双侧子宫。使用HE染色观察子宫内膜结构及厚度改变情况,免疫组化技术检测子宫内膜组织中VEGF、Ang-2、MVD含量的变化情况。 结果:(1)实验1:HE染色显示:空白组及假手术组内膜厚度无统计学差异(P>0.05)。缺血后子宫内膜细胞逐渐肿胀,细胞间隙增宽,缺血30分钟出现细胞和间质水肿,腺体结构完整,内膜连续性欠佳,内膜厚度较空白组及假手术组变薄(P<0.05);夹闭1小时后出现细胞及腺体水肿加重,腺体结构部分破坏。夹闭1h组内膜厚度较缺血0.5h内膜厚度薄(P<0.05),夹闭0.5h组较空白组和假手术组薄(P<0.05)。(2)实验1:免疫组化显示:空白组及假手术组VEGF、Ang-2、MVD表达无显著差异(P>0.05),空白组及假手术组VEGF、Ang-2、MVD表达高于夹闭组(P<0.05),夹闭1h组VEGF、Ang-2、MVD表达低于夹闭0.5h组(P<0.05)。(3)实验2:HE染色显示:内膜结构均未见明显异常,子宫内膜厚度假手术组较其余组厚(P<0.05);模型组子宫内膜厚度较其余组薄(P<0.05);中药治疗2组、中药治疗3组子宫内膜厚度较中药治疗1组厚(P<0.05);中药治疗2组及3组厚度无统计学差异(P>0.05)。(4)实验2:大鼠子宫组织免疫组化法检测VEGF、Ang-2、MVD含量的变化结果均显示:假手术组较其余组表达高(P<0.05);模型组较其余组表达低(P<0.05);中药治疗2组、中药治疗3组较中药治疗1组表达高(P<0.05);中药治疗2组及3组表达无统计学差异(P>0.05)。 结论:1.夹闭大鼠双侧卵巢动脉1h后可使子宫内膜变薄,VEGF、Ang-2、MVD表达降低,模型基本可以反映薄型子宫内膜的基本情况。2.补肾中药复方可增加子宫内膜厚度,增强VEGF、Ang-2、MVD的表达,有效促进子宫内膜的增生修复,因此,可以应用于辅助生殖技术中,治疗薄型子宫内膜。