拟南芥AP2/EREBP家族转录因子参与植物胁迫应答反应的功能性分析

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AP2/EREBP是植物中重要的转录因子大家族。该家族许多成员在植物胁迫应答反应中起重要的调控作用。以往的研究集中于拟南芥CBF,DREB2等保守性较高的小家族在抗逆反应中的调控作用,而拟南芥中其他大多数AP2/EREBP转录因子的功能至今仍不清楚。本实验室克隆了拟南芥AP2/EREBP家族全部147个转录因子中的145个并用基因芯片的方法研究了它们在低温、干旱、高盐、ABA等胁迫条件下的表达谱,发现了多个受到胁迫诱导的未经报道的AP2/EREBP转录因子。本文研究了部分新发现的转录因子的表达、DNA结合特性、转录激活活性以及可能具有的生理功能。用改进的酵母单杂交方法研究了18个转录调控因子蛋白的转录激活及DNA结合活性,发现12个具有体外转录激活功能,6个能与已鉴定的DRE或GCC序列相结合。 TINY2和QRAP2分别受到低温和干旱胁迫的强烈诱导,酵母单杂交实验表明TINY2和QRAP2蛋白能够特异结合DRE顺式元件,并具有转录激活活性。进一步的分析证明TINY2蛋白C端附近富含丝/苏氨基酸区域和QRAP2蛋白N端附近富含谷氨酰胺区域起到了转录激活功能。此外,作者还进一步研究了部分AP2/EREBP转录因子基因敲除突变体在胁迫条件下的表型变化,发现了3个突变体在正常条件下的表型与野生型相同,但在经过低温、高盐和ABA处理后的表型与野生型存在很大差异。CS1的表达受到低温诱导,它的缺失突变体cs1在低温条件下表现出比野生型更为敏感SS1的表达受到高盐诱导,它的缺失突变体ss1在高盐条件下的存活率与野生型相比明显偏低;ABI7的表达受到ABA诱导,它的缺失突变体abi7在添加了ABA的生长条件下的发育速度明显快于野生型植株。这3个转录因子的突变体在胁迫条件下与野生型的表型差异表明这3个转录因子在相应的胁迫信号传递过程中起到重要作用,为AP2/EREBP家族转录因子参与植物胁迫应答反应的功能性研究提供了新的依据。
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