姜黄素对高氧诱导AECII损伤的保护作用

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目的:通过观察姜黄素对高氧暴露下早产鼠AECⅡ细胞内氧化应激水平、核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位及其相关抗氧化酶基因表达的影响,探讨姜黄素对高氧诱导AECⅡ细胞损伤的保护作用及可能机制。  方法:原代培养的早产鼠AECⅡ,随机分为3组:空气组、高氧组、姜黄素干预组。姜黄素干预组给予10umol/L姜黄素处理后与高氧组分别通入95%O2/5%CO2高纯混合气(5L/min),10min后密封。各组均置于恒温培养箱中培养24小时(37℃5%CO2)。收集各组细胞,倒置显微镜下观察细胞生长及形态学变化;CCK-8法评估各组细胞活性;流式细胞术检测细胞内活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)水平;免疫荧光技术观察Nrf2核转位情况;实时荧光定量PCR法检测血红素氧合酶一1(HO一1)、谷胱甘肽过氧化物酶2(GPX2)mRNA的表达水平。  结果:1、与空气组比较,高氧组AECⅡ生长状态明显不良,表现为:悬浮细胞增多,细胞稀疏、散在分布,核浓缩;与高氧组比较,姜黄素干预组能明显改善AECⅡ的不良生长状态,表现为:细胞贴壁较好,悬浮细胞减少,细胞排列较紧密,核浓缩减少。2、与空气组比较,高氧暴露后AECⅡ细胞活性下降,差异有统计学意义(P<0.05);与高氧组比较,姜黄素干预后AECⅡ细胞活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。3、与空气组比较,高氧组AECⅡ细胞内ROS水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与高氧组比较,姜黄素干预后AECⅡ细胞内ROS水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4、与空气组比较,高氧暴露能诱导Nrf2由胞浆转入胞核,核内表达增加;与高氧组比较,姜黄素干预后能促进Nrf2由胞浆转入胞核,核内表达明显增多。5、与空气组比较,高氧组HO一1、GPX2mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与高氧组比较,姜黄素干预组HO一1、GPX2mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:姜黄素对高氧暴露AECⅡ细胞损伤具有保护作用,降低细胞内ROS水平、促进Nrf2核转位及上调抗氧化酶基因(HO-1和GPX2)的表达可能是其发挥保护作用的重要机制。
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