【摘 要】
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目的:研究星型固体硅微针（MN）对神经毒素传递体（NT-Ts）的体外大鼠经皮吸收及体内抗风湿性关节炎（RA）效果的影响。方法:构建高效液相色谱法（HPLC）测定NT含量的方法,并进行方法学考察。采用薄膜分散法制备NT-Ts,评价其粒径、Zeta电位以及NT的包封率等制剂学性质。扫描电镜（SEM）下观察MN表观形态,研究MN处理对SD雄性大鼠腹部皮肤刺激性和对NT-Ts的体外透皮吸收的影响。大鼠足底
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目的:研究星型固体硅微针（MN）对神经毒素传递体（NT-Ts）的体外大鼠经皮吸收及体内抗风湿性关节炎（RA）效果的影响。方法:构建高效液相色谱法（HPLC）测定NT含量的方法,并进行方法学考察。采用薄膜分散法制备NT-Ts,评价其粒径、Zeta电位以及NT的包封率等制剂学性质。扫描电镜（SEM）下观察MN表观形态,研究MN处理对SD雄性大鼠腹部皮肤刺激性和对NT-Ts的体外透皮吸收的影响。大鼠足底皮内注射完全弗氏佐剂（CFA）,构建风湿性关节炎模型,通过足趾容积测量仪和游标卡尺测定大鼠足趾肿胀体积和踝关节厚度,考察MN与NT-Ts对于足趾肿胀的抑制作用。Elisa试剂盒法测定大鼠血清中的IL-6、TNF-α和IL-1β水平,测定心、脾、胸腺和肾的脏器指数,考察NT-Ts对于免疫器官的影响。最后,通过苏木精-伊红染色法（H＆E）,考察NT-Ts和MN联合使用对踝关节组织病理的影响。结果:HPLC法测定结果,NT浓度在2.5 μg·mL-1～100 μg·mL-1范围内线性关系良好,日内日间精密度和重复性的RSD均小于2%,回收率在98%～102%之间,均符合方法学要求。采用蛋黄卵磷脂、胆固醇和脱氧胆酸钠制备的NT-Ts颗粒圆整,大小均匀,粒径为102.0±3.1 nm,Zeta电位为-16.0±0.4 mV,NT的包封率约为40%。SEM结果表明,MN阵列整齐,表面光滑完整。皮肤穿刺实验结果,MN可有效刺穿角质层,在皮肤表面形成一定的孔道,并且皮肤刺激性实验表明MN安全性良好,皮肤经MN处理后3天内可基本恢复正常。体外透皮实验结果,NT-Ts与MN结合使用、NT与MN相结合使用和NT-Ts单独使用时的皮肤累积渗透量分别是67.14±0.68μg·cm-2,32.25±4.32 μg·cm-2和 6.79±4.22 μg·cm-2,表明 NT-Ts 和 MN 结合使用可提高皮肤累积渗透量。体内药效学实验结果,NT-Ts和MN结合使用可以显著降低大鼠足趾肿胀程度和踝关节厚度,改善大鼠状态。MN处理后,NT-Ts可以显著降低大鼠血清中IL-6、TNF-α和IL-1β炎症因子水平,缓解炎症,有效防止免疫器官的增大。踝关节H＆E染色结果表明,MN处理的NT-Ts组可以减轻炎性细胞的浸润,减轻风湿性关节炎对软骨组织的损害,加速恢复过程,具有良好的抗风湿性关节炎作用。结论:本研究成功制备了 NT-Ts,MN处理可有效提高NT-Ts的大鼠皮肤通透性和风湿性关节炎的治疗效果,为局部经皮给药治疗风湿性关节炎提供了依据。
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