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高致病性禽流感病毒不仅严重危害养禽业的健康发展,还对人类公共卫生安全构成重大威胁。除了应用疫苗免疫防控流感以外,抗病毒药物在临床上也广泛用于流感的治疗。目前应用的抗流感病毒药物主要靶向NA蛋白及M2蛋白设计,近年来针对以上抗病毒药物的耐药毒株不断出现,开发新型广谱高效的抗病毒药物迫在眉睫。流感病毒在宿主细胞内的有效复制依赖于大量宿主因子的参与,筛选对流感病毒复制有重要影响的宿主因子并阐明其分子机制,可以为开发新型抗流感病毒药物提供潜在靶点。本课题前期通过高通量人全基因组siRNA文库筛选,鉴定到了可能影响流感病毒复制的宿主因子-UBX结构域包含蛋白11(ubiquitin regulatory X domain protein 11,UBXN11),亦称UBXD5或Socius,在此基础上我们对UBXN11蛋白在流感病毒复制过程中发挥的作用及其分子机制进行了深入研究。通过siRNA干扰下调UBXN11的表达再感染病毒后,病毒滴定结果表明UBXN11下调可以抑制流感病毒复制;在构建的UBXN11过表达细胞系的基础上,我们发现UBXN11的过表达可以显著促进流感病毒的复制。综上UBXN11在流感病毒复制过程中发挥正调控作用。应用激光共聚焦试验,结果显示UBXN11下调后病毒核糖核蛋白复合体(viral ribonucleoprotein complexes,vRNPs)输出细胞核的过程受到显著抑制,而当过表达UBXN11后vRNP复合体出核过程加快,即UBXN11可以影响vRNP复合体的出核。通过免疫共沉淀实验,我们证实UBXN11不与经典出核通路CRM1路径上的蛋白组分存在相互作用,而与病毒HA蛋白互作,激活能够诱导vRNP出核的MAPK信号通路,且能够促进HA蛋白在细胞膜上的聚集。进一步研究,结果显示HA蛋白和UBXN11蛋白均能够激活ERK1/2的磷酸化,且UBXN11与HA之间的相互作用能够增强ERK蛋白的磷酸化,从而激活MAPK信号通路,促进vRNP的出核。本研究揭示了宿主因子UBXN11通过与流感病毒HA相互作用促进HA在细胞膜上的聚集,从而激活MAPK信号通路诱导vRNP复合体出核的分子机制。研究结果丰富了我们对宿主因子调控流感病毒的复制过程的理解,同时也为将来开发新的药物来抵抗流感病毒的感染提供了可能的靶标。