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背景和目的：肾缺血再灌注(renal ischemia/reperfusion, rI/R)导致的急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)是围手术期常见并发症,与AKI相关的发病率和死亡率一直居高不下。AKI很少独立出现,往往同时伴有肾外多器官的病理性损伤和功能障碍,此为高死亡率的重要原因。其中,由于肺脏拥有巨大的毛细血管网络,对rI/R引起的血循环促炎因子更为敏感,更易发生急性肺损伤(acute lung injury, ALI),其病死率也更高。尽管AKI所致ALI逐渐成为研究热点,但临床上仍缺乏有效的防治手段,深入探索AKI病理背景下的肺保护手段和机制具有重要临床意义。右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)是一种作用于中枢或外周的高选择性α2肾上腺素受体(α2 adrenergic receptor,α2AR)激动剂。已有多项研究显示其对多种器官I/R损伤具有保护作用。亦有文章显示DEX可通过激活α2AR减轻肺干湿比重,降低肺部髓过氧化物酶活性,从而减轻rI/R导致的远端肺损伤。同时,另一项研究也显示DEX引起神经系统(海马)的a2AR活化,可进一步激活胞内黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK),减少由氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation, OGD)诱导的神经凋亡。FAK是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶,介导细胞基质间的粘附,参与外周肌动蛋白的重排以及细胞—基质,细胞—细胞结合复合体构建,降低血管通透性,是调节血管内皮屏障功能的一个重要靶点。因此,本研究通过构建rI/R致ALI小鼠模型,单独或联合应用高选择性α2AR激动剂DEX和α2AR拮抗剂阿替美唑(atipamezole,Atip),检测在体rI/R小鼠肺微血管通透性。培养C57BL/6J小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVEC),用rI/R小鼠血清刺激PMVEC,联合应用DEX,Atip,FAK磷酸化抑制剂,检测PMVEC中磷酸化FAK含量以及总FAK含量,观察F-Actin及内皮细胞层通透性改变,证实如下假设：PMVEC细胞膜上α2AR活化后,激活FAK并通过其介导阻止细胞骨架收缩,维持内皮细胞屏障完整性,从而降低rI/R损伤引起的肺微血管通透性增高。方法：1.DEX与rI/R小鼠血清对肺微血管内皮屏障通透性的影响1.1构建rI/R小鼠模型,收集rI/R小鼠血清1.2 C57BL/6J小鼠PMVEC的复苏与培养1.3 Transwell检测不同浓度rI/R血清致肺微血管内皮细胞层通透性改变的作用1.4 Transwell检测不同浓度DEX对rI/R血清致肺微血管内皮细胞层通透性增高的影响2.DEX介导的α2AR激活对小鼠PMVEC中FAK表达的影响2.1免疫荧光检测rI/R血清和DEX对PMVEC中P-Tyr397FAK表达情况2.2免疫印迹检测rI/R血清和DEX对PMVEC中P-Tyr397FAK与总FAK表达情况3.DEX介导的FAK激活对rI/R致小鼠肺血管通透性增高的作用与机制3.1在体实验检测DEX介导的FAK激活对rI/R小鼠肺微血管通透性改变的作用3.2 Transwell检测DEX介导的FAK激活对rI/R血清致肺微血管内皮细胞层通透性增高的作用3.3免疫荧光检测DEX介导的FAK激活对rI/R血清致PMVEC中F-actin的作用结果：1.离体情况下,不同浓度rI/R血清刺激可引起肺微血管内皮细胞层通透性不同程度增高。2.DEX剂量依赖性降低rI/R血清刺激肺微血管内皮细胞层引起的FIT C-荧光标记白蛋白通透率增高3.离体情况下,20%r I/R血清和01μM DEX均可引起PMVEC中P-Tyr397FAK表达增高,抑制a2AR活化后,可抑制01μM DEX引起的P-Tyr397FAK表达增高。20%rI/R血清和0.1μM DEX刺激PMVEC,20%r I/R血清引起PMVEC中总FAK表达增高,DEX引起PMVEC中总FAK表达降低,抑制α2AR活化后,可抑制DEX引起的总FAK表达降低。4.在体或离体情况下,抑制α2AR或FAK激活后,DEX降低rI/R损伤致肺血管通透性增高的作用减弱。PMVEC申F-actin的重聚参与了DEX的这种保护作用。结论：1.成功建立了离体AKI致ALI模型。2.DEX可通过激活α2AR降低rI/R损伤引起的肺血管通透性增高。3.DEX通过激活α2AR引起FAK磷酸化,降低FAK总量,从而调节F-actin重排可能是降低rI/R损伤致肺血管通透性增高的机制。