目的:通过探究不同剂量的亚砷酸钠（NaAsO2）对人肝星状细胞内自噬相关蛋白表达的的影响,以及研究PTEN、Hes1甲基化在NaAsO2诱导人肝星状细胞自噬过程中的作用。方法:1.应用Illumina 850K甲基化芯片分析对照组及干预组数据,筛选出具有差异甲基化位点的基因。2.采用MTT法确定NaAsO2染毒LX-2细胞IC50,并分成亚砷酸钠（NaAsO2）高、中、低剂量组。3.观察自噬现象（透射电镜）。4.利用实时荧光定量（Real-Time Quantitative PCR）检测NaAsO2干预后LX-2细胞后第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因（PTEN）、发状分裂相关增强子1（Hes1）、微管相关蛋白轻链A/B（LC3）、重组人自噬效应蛋白（Beclin-1）的m RNA表达水平。5.蛋白免疫印迹法（Western blot）测定不同浓度NaAsO2干预LX-2细胞PTEN、Hes1、LC3、Beclin-1、蛋白激酶B（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白的表达水平。6.采用CCK8法检测甲基化抑制剂5-Aza-Cd R对LX-2细胞增殖抑制的影响。7.采用Western blot检测甲基化抑制剂（5-Aza-Cd R）+NaAsO2干预LX-2细胞后PTEN、Hes1、α-SMA蛋白表达水平。8.细胞免疫组织化学技术观察PTEN、Hes1、α-SMA蛋白表达水平。结果:1.Illumina 850K甲基化芯片筛选出PTEN在启动子区cg19358349位点高甲基化,在启动子区cg23149470、cg10041390、cg10205334、cg16404460、cg16686761位点低甲基化;Hes1在启动子区cg21428647位点高甲基化。2.NaAsO2染毒LX-2细胞,测得IC50为28.39umol/L,确定NaAsO2组的高、中、低剂量水平分别为15.0μmol/L、10.0μmol/L、5.0μmol/L,对照组为（0.0μmol/L）,各组浓度升高,抑制作用显著升高。3.通过透射电镜,在NaAsO2高剂量组作用48h后,与对照组相比下,自噬小体的表达明显增加,脂滴的分布较对照组更加密集。4.与对照组比,NaAsO2低、中剂量组PTEN m RNA表达水平上调（P＜0.05）;与对照组相比,NaAsO2低、中剂量组Hes1 m RNA表达水平有上升趋势,高剂量组表达下调（P＜0.05）;与对照组相比,Beclin-1 m RNA表达水平在NaAsO2中剂量组上调（P＜0.05）;与对照组比,在NaAsO2中剂量组中LC3 m RNA表达水平上调,高剂量组表达下调（P＜0.05）。5.与对照组比较,NaAsO2、高剂量组大幅上调了LC3、Hes1、Beclin-1、α-SMA的蛋白表达;与对照组比较,NaAsO2各干预组均显著下调了m TOR、AKT蛋白的表达（P＜0.05）,PTEN蛋白的表达在NaAsO2中、高剂量组中增多（P＜0.05）。6.通过CCK8实验获得细胞增殖抑制拟合曲线,得到甲基化抑制剂干预下的LX-2细胞IC50浓度为919.6μmol/L。同一段时间内,甲基化抑制剂浓度的提高促使OD值逐渐减小,LX-2的抑制率上升态势,同一时间段LX-2细胞各个浓度甲基化抑制剂组与对照组比较均具有统计学意义（P＜0.05）;相同药物浓度影响下,由于药物作用时限的增长,LX-2细胞OD值不断降低,抑制率也呈上升态势,相同的用药浓度分别在24h、48h、72h的影响时限下,LX-2细胞加药组与对照组相比均有显著性差异（P＜0.05）。7.与对照组比较,对照组+抑制剂组PTEN蛋白表达水平下调,与对照组+抑制剂组比较,高砷+抑制剂组中PTEN蛋白表达水平升高（P＜0.05）;与对照组比较,亚砷酸钠高剂量组、低砷+抑制剂组Hes1蛋白表达水平上调,与对照组+抑制剂组比较,高砷+抑制剂组Hes1蛋白表达水平上调（P＜0.05）;与对照组比较,亚砷酸钠高剂量组、高砷+抑制剂组α-SMA蛋白表达水平上调;与对照组+抑制剂组比较,高砷+抑制剂组α-SMA蛋白表达水平下调（P＜0.05）。8.与对照组相比,在NaAsO2高剂量组中染色较深,α-SMA和Hes1蛋白表达上升,PTEN表达下调。结论:DNA甲基化参与NaAsO2诱导人肝星状细胞发生自噬。甲基化抑制剂对LX-2细胞活性有抑制作用的影响,并可能降低NaAsO2诱导的细胞自噬水平,因此也可以抑制由NaAsO2所引起的肝纤维化发展过程。砷所致肝脏损害的发病机理尚有待进一步研究。