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伏马毒素(Fumonisins)是一种主要由串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)产生的具有毒性及致癌性的真菌毒素,通常存在于受此类真菌污染的玉米等粮食作物及其相关的食品和动物饲料中。该毒素能够引起人畜多种疾病,严重威胁人类及动物的健康,因而越来越引起人们的关注。伏马毒素有多种结构类似物,其中伏马毒素B1(Fumonisin B1,FB1)是污染粮食作物的主要成分,也是引发毒性的主要原因。本研究在制备完全抗原及抗FB1多克隆抗体的基础上,建立了针对FB1的间接竞争ELISA、化学发光ELISA及免疫胶体金快速检测方法。由于FB1是一种不具备免疫原性的半抗原小分子,必须通过与载体蛋白的偶联获得免疫原性。首先以戊二醛法将半抗原FB1与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联成为完全抗原KLH-FB1,KLH-FB1作为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗血清;以戊二醛法将半抗原FB1与另一种载体蛋白卵清白蛋白(OVA)偶联成为完全抗原OVA-FB1,OVA-FB1作为包被原进行血清效价检测及后续ELISA实验。间接ELISA检测血清效价,效价可达1:9600。用辛酸-硫酸铵法、Protein G亲和层析法分别纯化制备的多克隆抗体,结果表明Protein G亲和层析法纯化的多抗较纯,抗体活性也较好。利用制得的抗FB1多克隆抗体,分别建立了间接竞争ELISA检测方法与化学发光ELISA检测方法。其中,间接竞争ELISA检测在37℃包被4h,包被抗原0.5μg/mL,一抗稀释度1:4000,二抗稀释度1:6000的条件下,检测灵敏度为0.41ng/mL,检测线性范围为0.41-33.3ng/mL,与黄曲霉毒素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮等常发真菌毒素无交叉反应。化学发光ELISA检测在包被抗原0.5μg/mL,一抗稀释度1:5000,二抗稀释度1:40000的条件下,检测灵敏度为0.14ng/mL,检测线性范围为0.14-33.3ng/mL。利用两种检测方法同试剂盒检测同时应用于样品的加标回收实验,检测样品回收率在各自线性范围内达到80%以上。此外,还进行了FB1胶体金免疫层析试纸的初步研究,制备了检测试纸,检测下限为100ng/mL。该法虽然检测限较高,但更适合于现场快速检测。